[發明專利]禽腺病毒4型卵黃抗體及其制備方法在審
| 申請號: | 201810977191.5 | 申請日: | 2018-08-26 |
| 公開(公告)號: | CN109053880A | 公開(公告)日: | 2018-12-21 |
| 發明(設計)人: | 張毓金;謝秉超;嚴悌昆;敖艷華;劉為和 | 申請(專利權)人: | 廣州漁躍生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C07K16/08 | 分類號: | C07K16/08;C07K16/02 |
| 代理公司: | 廣州勝沃園專利代理有限公司 44416 | 代理人: | 鐘小敏 |
| 地址: | 510000 廣東省*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 禽腺病毒 上清液 卵黃抗體 制備 卵黃液 獸用生物制品 羥基硬脂酸酯 緩沖鹽溶液 苯酚溶液 低速離心 聚乙二醇 免疫蛋雞 免疫雞蛋 滅活疫苗 凝膠層析 混勻 抗體 去脂 無菌 回收率 改良 濃縮 | ||
1.禽腺病毒4型卵黃抗體的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
A)用禽腺病毒4型滅活疫苗免疫蛋雞,獲得免疫雞蛋,經消毒后,分離蛋白,收集卵黃,進一步獲得卵黃液;
B)將上述卵黃液與Tris-HCl緩沖鹽溶液混合,加入苯酚溶液,混勻,靜置,低速離心,收集上清液;
C)往上清液中加入終濃度為0.2~1.0(m/v)的聚乙二醇15-羥基硬脂酸酯,攪拌混合,靜置,離心,收集上清液;
D)將步驟C)得到的上清液經純化、濃縮、無菌步驟,得到卵黃抗體。
2.如權利要求1所述的制備方法,其特征在于,所述步驟B)中卵黃液與Tris-HCl緩沖鹽按1:(3~6)的體積比混合。
3.如權利要求1或2所述的制備方法,其特征在于,所述步驟B)中卵黃液與苯酚溶液按1:(1~3)的體積比混合。
4.如權利要求1所述的制備方法,其特征在于,所述純化步驟具體為:
往上述上清液中按1:1的質量比加入磷酸鹽緩沖液,攪拌溶解,加入終濃度0.01~1%(m/v)的CMC值為0.1~8.0mM的去污劑,混勻,靜置,離心,收集沉淀,將沉淀用無菌生理鹽水溶解后,經大孔樹脂吸附除去去污劑,即得。
5.如權利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述步驟S2中加入終濃度為0.06~1%(m/v)的CMC值為0.1~8.0mM的去污劑。
6.如權利要求4或5所述的制備方法,其特征在于,所述去污劑的CMC值為0.1~3.0mM。
7.如權利要求6所述的制備方法,其特征在于,所述去污劑的CMC值為1.33。
8.如權利要求7所述的制備方法,其特征在于,所述去污劑為SDS。
9.一種如權利要求1~8任一所述制備方法制備得到的禽腺病毒4型卵黃抗體。
10.如權利要求9所述的禽腺病毒4型卵黃抗體,其特征在于,所述卵黃抗體中脂類殘留量低于1%。
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