[發明專利]一種利用DNA甲基化轉移酶抑制劑提高萊茵衣藻生物量和類胡蘿卜素含量的方法

有效

• 申請號: 201810970732.1
• 申請日: 2018-08-24
• 公開（公告）號: CN110857448B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 姜建國;梁明華;宋德幸;梁志聰
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12P23/00
• 分類號: C12P23/00;C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 崔紅麗

本發明公開一種利用DNA甲基化轉移酶抑制劑提高萊茵衣藻生物量和類胡蘿卜素含量的方法，屬于食品科學技術領域。該方法是將萊茵衣藻細胞在含有DNA甲基化轉移酶抑制劑的液體培養基中培養一定時間后，每天監測生物量，收集藻細胞，提取色素。本發明的方法簡單易行，效果好，操作方便，加入DNA甲基化轉移酶抑制劑后能快速、有效提高萊茵衣藻的生物量和類胡蘿卜素含量。本發明中DNA甲基化轉移酶抑制劑的用量極少，效果顯著，操作方便。

技術領域

本發明屬于食品科學技術領域，具體涉及一種利用DNA甲基化轉移酶抑制劑提高萊茵衣藻生物量和類胡蘿卜素含量的方法。

背景技術

萊茵衣藻培養條件簡單，生長周期較短，并已完成全基因組測序，遺傳背景清晰，易于遺傳轉化，可以對真核蛋白進行準確翻譯后加工修飾和折疊；屬于安全級(generallyrecognized as safe，GRAS)微生物，表達產物不含毒素物質，便于純化，以降低蛋白生產成本；此外，培養萊茵衣藻不需要占用寶貴的耕地資源，不用消耗大量的肥料及淡水資源，已被認為是極具發展潛力的生物反應器，目前，利用萊茵衣藻作為生物反應器已成功表達了多種重組蛋白，如重組蛋白疫苗、單克隆抗體、蛋白藥物和工業蛋白酶等，部分產品已經實現了商品化。萊茵衣藻能利用太陽能和水制氫，大大降低生產成本，被認為是非常有開發潛力的生物制氫的物種；還能開發利用萊茵衣藻生產類胡蘿卜素、油脂和長鏈不飽和脂肪酸等高附加值產品。

雖然萊茵衣藻作為生物反應器已經得到了重視，并有一定的應用，但有些方面還有待于進一步開發改進，其中一個方面是單純光合作用自養的萊茵衣藻生物量較低，從而影響重組蛋白達產量，或降低最終目的產物(包括類胡蘿卜素在內的高附加值產品)的產量。高密度異養發酵或混養是提高生物量的一個手段，此外還可以通過化學物質的誘導作用來提高生物量。

發明內容

為了克服現有技術的缺點與不足，本發明的目的在于提供一種利用DNA甲基化轉移酶抑制劑提高萊茵衣藻生物量和類胡蘿卜素含量的方法。該方法能夠提高萊茵衣藻中類胡蘿卜素、油脂、重組蛋白、氫氣等高附加值物質的產量，是提高萊茵衣藻的生物量是一個有效的途徑。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

本發明提供一種DNA甲基化轉移酶抑制劑在提高萊茵衣藻生物量和類胡蘿卜素含量中的應用。

一種利用DNA甲基化轉移酶抑制劑提高萊茵衣藻生物量和類胡蘿卜素含量的方法，包括如下步驟：將萊茵衣藻細胞在含有DNA甲基化轉移酶抑制劑的液體培養基中培養一定時間后，每天監測生物量，收集藻細胞，提取色素。

所述的DNA甲基化轉移酶抑制劑包括5-氮雜胞苷(5-azacytidine，簡稱 5AzaC)和5-氮雜-2′-脫氧胞苷(5-aza-2'-deoxycitydine，簡稱5AzadC)中的至少一種。

所述的DNA甲基化轉移酶抑制劑的終濃度為10～1000μM。

所述的培養的時間為4～20天及以上。

所述的培養的條件為在光照度為500～10000Lx，光暗周期為6～18h：6～ 18h，溫度為15～30℃，以10～200r/min的轉速震蕩培養，優選為在光照度為 8000Lx，光暗周期為14h：10h，溫度為25℃，以50r/min的轉速震蕩培養。