[發明專利]蘋果砧木M9-T337的組培快繁方法

在審

• 申請號: 201810970144.8
• 申請日: 2018-08-24
• 公開（公告）號: CN109220789A
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發明（設計）人: 段珍珍;李志平;王彥賀;蘭利峰
• 申請（專利權）人: 陜西青美生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京紐樂康知識產權代理事務所(普通合伙) 11210
• 代理人: 秦月貞

本發明公開了一種蘋果砧木M9?T337的組培快繁方法，包括如下步驟：取M9?T337莖尖作為外植體材料，清洗消毒后接種于誘導培養基上誘導出芽，誘導的芽在顯微鏡下剝出莖尖，再次消毒后轉接到緩沖培養基上，誘導無菌芽，無菌芽轉接到誘導叢生芽的培養基上培養，叢生芽分株轉接到增殖培養基上培養，增殖苗大小分級后，轉接到無糖培養盒中，25?35天后出苗移栽。本發明的蘋果砧木M9?T337的組培快繁方法通過先進的組培生產技術生產M9?T337組培苗，及利用無糖快繁技術進行生根練苗，可以加快M9?T337產業優質高效發展。

技術領域

本發明涉及植物組培快繁技術領域，具體來說，涉及一種蘋果砧木M9-T337的組培快繁方法。

背景技術

M9-T337是荷蘭木本苗木植物苗圃檢測服務中心從M9系選育出來的蘋果矮化自根砧木優系，又稱NAKB T337。比M9矮化程度大20%，易壓條繁殖。果業發達國家（如意大利、法國、荷蘭等）廣泛推廣并已獲得巨大成功的高紡錘樹形果園多采用這種矮化砧。該砧木具有更好的苗圃性狀，除了壓條易繁殖外，還能春季利用硬枝進行扦插生根，苗木生長整齊。葉片略小，易萌發二次枝。果業發達國家生產上利用該砧木，將兩年生自根砧成品苗于60-70cm處短截，培育成帶分枝的大苗，具有易成花、早豐產、適應性廣等特點，建園成形快、結果早，通常第2-3年即形成可觀產量。M9-T337矮化自根砧育苗具有育苗簡單、園貌整齊、結果早、產量高、品質好等優點，是世界蘋果生產發展的趨勢。

2011年，煙臺市果茶工作站利用國家項目支持從意大利引進一批M9-T337脫毒砧木定植于山東省萊州市小草溝大自然園藝科技有限公司繁育基地。通過三年的實驗研究，和對前人育苗經驗進行歸納總結，提出了M9-T337矮化自根砧的育苗技術流程，從砧木母本園建設、砧木繁育、苗木繁育、嫁接技術、嫁接苗管理、土肥水管理和培養帶分枝大苗7個方面，對M9-T337矮化自根砧蘋果苗的繁育技術進行了論述。目前，M9-T337種苗市場短缺，急需一種M9-T337組織培養增殖的配方和快速生根的方法。

發明內容

針對相關技術中的上述技術問題，本發明提出一種蘋果砧木M9-T337的組培快繁方法，能夠克服現有技術的上述不足。

為實現上述技術目的，本發明的技術方案是這樣實現的：

一種蘋果砧木M9-T337的組培快繁方法，包括以下步驟：

（1）M9-T337外植體選擇與接種：

取高5-8cm、長勢良好均勻的、幼嫩的M9-T337莖尖作為外植體材料；洗去表面的塵土，用洗潔精清洗20min，進而在流水下沖洗2h，最后用無菌水沖洗后置于超凈工作臺，進行消毒，消毒結束后，接種于誘導培養基上，誘導培養基配方為MS+6-BA0.7mg/L+NAA0.1mg/L+2%-3%蔗糖，每瓶接種3個外植體，置于培養室的培養架上誘導培養，20天誘導出芽；

（2）莖尖脫毒：

將步驟（1）誘導的芽在顯微鏡下剝出莖尖，再次消毒，消毒結束后將芽的莖尖轉接到緩沖培養基上，誘導無菌芽，所述緩沖培養基配方為MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.01mg/L+2%-3%蔗糖，培養40天；

（3）叢生芽誘導：

將步驟（2）培養的生長良好、經分子技術檢測無菌、高2-5cm的M9-T337無菌芽轉接到誘導叢生芽的培養基上，所述誘導叢生芽的培養基配方為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+3%蔗糖，放置到培養室培養；

（4）增殖擴繁：

將步驟（3）培養的M9-T337叢生芽分株轉接到增殖培養基上，放置到培養室培養，30天后可再次轉接；

（5）生根培養：