[發明專利]一種制備利拉魯肽的方法

有效

• 申請號: 201810959031.8
• 申請日: 2018-08-21
• 公開（公告）號: CN110845600B
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發明（設計）人: 王孝花;馬健
• 申請（專利權）人: 魯南制藥集團股份有限公司
• 主分類號: C07K14/605
• 分類號: C07K14/605;C07K1/16;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種制備利拉魯肽的方法，其特征在于包括以下過程：

通過Fmoc固相合成法將Fmoc-Glu-2-R側鏈羧酸連接到氨基類型樹脂A上得Fmoc-Glu(Resin)-R氨基酸樹脂I；再通過固相偶聯反應依次與多肽片段NH2-V-R、多肽片段NH2-VI-R、多肽片段NH2-VII-R、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Asp(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Ala-OH、Boc-His(Trt)-OH偶聯合成利拉魯肽肽樹酯：

Boc-His(Trt)-Ala-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(tBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-Glu(Resin)-Ala-Ala-Lys(Glu(N^α-Palmitoyl)-OtBu)-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-R，最后在酸性條件下裂解、色譜純化、冷凍干燥得到高純度利拉魯肽；

其中所述多肽片段NH2-V-R為NH2-Ala-Ala-Lys(Glu(N^α-Palmitoyl)-OtBu)-R、多肽片段NH2-VI-R為NH2-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-R、多肽片段NH2-VII-R為NH2-Trp(Boc)-Leu-Val-Arg(pbf)-Gly-Arg(pbf)-Gly-R；R為phenylisopropyl easter。

2.根據權利要求1所述制備利拉魯肽的方法，其特征在于，氨基類型樹脂A選自RinkAmide MBHA Resin和Rink Amide AM Resin中的一種，氨基類型樹脂A的替代度為0.3～0.5mmol/g；Fmoc-Glu-2-R為Fmoc-Glu-2-phenylisopropyl easter；Fmoc-Glu-2-R側鏈羧酸與氨基類型樹脂A連接時，耦合試劑組合選自PyBOP/DIPEA/HOBt和DEPBT/DIEA中的一種。

3.根據權利要求1所述制備利拉魯肽的方法，其特征在于，Fmoc-Glu(Resin)-R氨基酸樹脂I進行偶聯反應前須用裂解液i脫除保護基R制得Fmoc-Glu(Resin)-OH；裂解液i為含體積分數1.5％～2.5％TFA的DCM溶液，酸解時間為5min，酸解次數為2～3次。

4.根據權利要求1所述制備利拉魯肽的方法，其特征在于，Fmoc-Glu(Resin)-R氨基酸樹脂I依次與多肽片段NH2-V-R、多肽片段NH2-VI-R、多肽片段NH2-VII-R耦合時，耦合試劑組合選自PyBOP/DIPEA/HOBt、HATU/DIPEA/HOBt、HBTU/DIPEA/HOBt和DIC/HOBt中的一種。