[發明專利]一種快速評價柑橘潰瘍病藥劑藥效的方法

有效

• 申請號: 201810955632.1
• 申請日: 2018-08-21
• 公開（公告）號: CN109022537B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發明（設計）人: 歐智濤;陳香玲;陳東奎;姜新;趙洪濤;劉要鑫;黃宏明;李果果;鄧鐵軍;黃其椿;王茜;劉福平;汪妮娜;廖惠紅;張蘭
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區農業科學院園藝研究所
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18
• 代理公司: 南寧市吉昌知識產權代理事務所(普通合伙) 45125
• 代理人: 李秋琦

本發明屬于柑橘病害防治技術領域，尤其是一種快速評價柑橘潰瘍病藥劑藥效的方法。一種快速評價柑橘潰瘍病藥劑藥效的方法，包括如下步驟：(1)接種用主要器具準備；(2)柑橘潰瘍病病葉采集；(3)柑橘健康離體葉片采集；(4)潰瘍病葉片處置；(5)離體葉片處置；(6)接種病菌；(7)接種后藥劑處置和(8)藥劑后處置。本發明的方法所用器具簡單，無高難度技術操作，簡單易行；跳過細菌液準備階段，縮短病菌接種時間，占用空間小；發病癥狀同田間癥狀一致，易識別，藥劑防治效果差異顯著，接種發病條件容易控制，容易實現技術方法的標準化。

技術領域

本發明屬于柑橘病害防治技術領域，尤其是一種快速評價柑橘潰瘍病藥劑藥效的方法。

背景技術

在柑橘病蟲害防治領域的農藥藥效試驗中，除了田間噴灑預防實驗之外，由于相對環境較好控制，實驗室中模擬病害發生的方法也廣泛應用，相關研究均需要人工接種發病這一基本手段。而病害人工發病的方法可以選擇活體接種或離體接種，其中活體接種的優點是更能反映病菌發病的本貌，缺點是試驗周期長，占用較多空間和資源，常處于多因子環境中，局部條件控制較困難；離體接種則可以節省時間，節約資源，實施難度減小，提高試驗規模和效率。許多研究結果也表明，離體接種結果和活體接種是一致的，因此植物病蟲害的相關研究均采用離體接種方式進行。

柑橘潰瘍病是一種危害性很大的細菌性病害，已被多國和地區列為檢疫對象，其特點是傳染性強，傳染途徑多樣，病害發生后影響樹體生長，嚴重的降低果實商品率，影響柑橘產業發展。

一般植物病蟲害防治藥劑的篩選評價，通常采用大田噴藥試驗和實驗室接種試驗，大田試驗通常對植株進行藥劑處理，和CK株發病率做比較，以評價藥效，實驗室方法如管碟法比較藥劑所產生的抑菌圈評價藥劑對病菌的抑制作用。近年來，柑橘產業蓬勃發展，其中不乏對柑橘潰瘍病敏感的品種大量種植和推廣，柑橘潰瘍病的防治也刻不容緩，而由于柑橘種植企業、個人的種植栽培技術和經驗良莠不齊，給其防治帶來較大困難。除了傳統防治柑橘潰瘍病的銅制劑、抗生素、乙蒜素之外，市場上也充斥著大量新型柑橘潰瘍病防治藥劑，要評價該類藥劑是否有效，傳統藥劑篩選，大田試驗周期過長，效率低，環境復雜，條件難以控制；而實驗室藥劑篩選的具體操作需要較好植物學、微生物學知識背景為基礎。要達到簡化操作的目的，使更多普通種植者能自行檢驗并實際操作，急需開發一種新的快速檢測方法。

公開于該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不應當被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明的目的是提供一種快速評價柑橘潰瘍病藥劑藥效的方法。

本發明是通過以下技術方案來實現的：

一種快速評價柑橘潰瘍病藥劑藥效的方法，包括以下步驟：

(1)接種用器具的準備：用接種針、消毒剪刀、研缽、滅菌濾紙、潰瘍病防治藥劑和普通培養皿做接種用器具，培養皿規格視不同品種柑橘葉片大小而定，清潔消毒后備用；

(2)柑橘潰瘍病葉采集：選取明顯潰瘍病病癥特征的葉片作為菌種來源，葉片發病病癥特點是病灶部位周圍有明顯黃色菌圈，發病中期時病灶中心為木栓化，呈火山口開裂狀；

(3)柑橘健康離體葉片采集：選用葉片為本次梢期所生葉面積已展開至最大，顏色轉綠的新葉，用消毒剪刀剪取與步驟(1)中相應培養皿規格大小近似的葉片作為供試材料；

(4)潰瘍病葉片的處置：將步驟(2)準備的潰瘍病葉片表面進行清洗，采用75％酒精進行簡單消毒，用消毒剪刀將葉片上病斑延菌圈分界處剪下，去掉中間木栓化病灶部，減少雜菌侵入，將剪下的菌圈葉片組織放入研缽，加入5mL無菌水，進行研磨后靜置5min，吸取上清菌液，備用；