[發明專利]一種硫酸多粘菌素B的制備方法

有效

• 申請號: 201810952403.4
• 申請日: 2018-08-21
• 公開（公告）號: CN108977482B
• 公開（公告）日: 2020-11-24
• 發明（設計）人: 單含文;秦濤;呂稼鋒;斯曉忠;張濤鑄
• 申請（專利權）人: 浙江孚諾醫藥股份有限公司
• 主分類號: C12P21/04
• 分類號: C12P21/04;C12R1/01
• 代理公司: 上海微策知識產權代理事務所(普通合伙) 31333
• 代理人: 湯俊明

1.一種硫酸多粘菌素B的制備方法，其特征在于，其至少包括以下步驟：

(1)多粘菌素B種子制備：將產多粘菌素B菌種置于培養基A中進行復蘇培養，然后置于培養基B中進行搖床培養，得到活化的產多粘菌素B菌種；

(2)發酵：將步驟(1)得到的活化的產多粘菌素B菌種加入至培養罐C中，種子罐培養；然后置于培養罐D中，進行發酵罐培養，得到多粘菌素B菌種的發酵液；

(3)精制：對步驟(2)得到的多粘菌素B菌種的發酵液進行過濾、離子交換樹脂處理、大孔樹脂處理、解吸液堿結晶、轉鹽、脫色、納濾濃縮、真空冷凍干燥，得到硫酸多粘菌素B；所述離子交換樹脂為強酸陽離子樹脂；所述強酸陽離子樹脂為4-磺酰胺苯甲酰亞胺和4-磺酸基吡啶-3-磺酰胺改性732陽離子交換樹脂；所述步驟(2)中發酵罐培養過程中還包括補料過程，所述補料配方中每100ml培養基含有以下組份：L-蘇氨酸0.01-0.1g、硫酸銨0.1-0.5g、余量為水；所述步驟(1)中產多粘菌素B菌種為多粘類芽孢桿菌(Paenibacilluspolymyxa)。

2.根據權利要求1所述硫酸多粘菌素B的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中所述培養基A中每100ml培養基含有以下組份：蔗糖1-3g、蛋白胨1-5g、磷酸氫二鉀0.1-0.5g、七水硫酸鎂0.2-1g、瓊脂1-3g、余量為水。

3.根據權利要求1所述硫酸多粘菌素B的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中所述培養基B中每100ml培養基含有以下組份：小麥粉7-10g、淀粉酶0.002-0.01g、酵母粉0.2-0.6g、碳酸鈣0.1-0.5g、磷酸氫二鈉0.01-0.03g、硫酸銨0.2-0.7g、余量為水。

4.根據權利要求1所述硫酸多粘菌素B的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中所述培養罐C中每100ml培養基含有以下組份：小麥粉7-10g、淀粉酶0.002-0.01g、酵母粉0.2-0.6g、碳酸鈣0.1-0.5g、磷酸氫二鈉0.01-0.03g、硫酸銨0.2-0.7g、消泡劑0.01-0.05g、余量為水。

5.根據權利要求1所述硫酸多粘菌素B的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中所述培養罐D中每100ml培養基含有以下組份：小麥粉10-15g、淀粉酶0.002-0.01g、酵母粉0.5-1g、碳酸鈣0.1-0.5g、磷酸氫二鈉0.01-0.03g、硫酸銨0.2-0.7g、消泡劑0.01-0.05g、L-蘇氨酸0.01-0.1g、余量為水。

6.根據權利要求1所述硫酸多粘菌素B的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中大孔樹脂包括D001、D113、D201、D301、D370、D152中一種。