[發明專利]一種快速檢測三種小麥根莖部病害的方法在審
| 申請號： | 201810950905.3 | 申請日： | 2018-08-21 |
| 公開（公告）號： | CN108893557A | 公開（公告）日： | 2018-11-27 |
| 發明（設計）人： | 于金鳳;孫曉鳳;李鵬昌;張德珍;徐娜娜;劉愛新 | 申請（專利權）人： | 山東農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429 | 代理人： | 張紅軍 |
| 地址： | 271018 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 根莖 病害 快速檢測 小麥 樣本 小麥根腐病菌 小麥紋枯病菌 植物保護領域 多重PCR檢測 技術支持 小麥苗期 有效防治 早期診斷 小麥莖 病菌 應用 田間 敏感 檢測 | ||
1.一種快速檢測三種小麥根莖部病害的方法，其特征在于，包括以下步驟：
ST1 取樣，田間取苗期植株；
ST2 提取基因組DNA，采用改良的CTAB法提取基因組DNA；
ST3 進行多重 PCR 反應，添加根據禾谷絲核菌rDNA-ITS、麥根腐平臍蠕孢菌rDNA-ITS、鐮孢菌（
ST4 進行DNA電泳并分析。
2. 根據權利要求1所述的一種快速檢測三種小麥根莖部病害的方法，其特征在于，步驟ST3所述設計的引物為SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.6 。
3.根據權利要求2所述的一種快速檢測三種小麥根莖部病害的方法，其特征在于，步驟ST3所述退火30s，溫度為55℃。
4.根據權利要求2所述的一種快速檢測三種小麥根莖部病害的方法，其特征在于，步驟ST3中WKF-S18/WKR-S8濃度為0.24-0.48μmol/L。
5.根據權利要求2所述的一種快速檢測三種小麥根莖部病害的方法，其特征在于，步驟ST3中RBF-S2/RBR-S1濃度為0.16-0.48μmol/L。
6.根據權利要求2所述的一種快速檢測三種小麥根莖部病害的方法，其特征在于，步驟ST3中EF-SF9/EF-SR8濃度為0.24-0.40μmol/L。
7.根據權利要求2所述的一種快速檢測三種小麥根莖部病害的方法，其特征在于，步驟ST3中Taq DNA聚合酶為1.5-2.5U。
8.根據權利要求2所述的一種快速檢測三種小麥根莖部病害的方法，其特征在于，步驟ST3中dNTP濃度為0.15-0.25mmol/L。
9.根據權利要求1-8中任一項所述的一種快速檢測三種小麥根莖部病害的方法，其特征在于，步驟ST3中WKF-S18/WKR-S8為0.36μmol/L，RBF-S2/RBR-S1為0.48μmol/L，EF-SF9/EF-SR8為0.24μmol/L，Taq DNA聚合酶為2.5 U, d NTP為0.15mmol/L。
10.根據權利要求9所述的一種快速檢測三種小麥根莖部病害的方法，其特征在于，同時擴增小麥紋枯病菌、小麥根腐病菌和小麥莖基腐病菌的基因組DNA，獲得174、418和 600bp 的特異條帶，三種病菌的檢測靈敏度都是100 pg。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于山東農業大學，未經山東農業大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201810950905.3/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
