[發(fā)明專利]一種豬用疫苗載體

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810938346.4
• 申請(qǐng)日: 2015-07-10
• 公開（公告）號(hào): CN109652450A
• 公開（公告）日: 2019-04-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜恩岐
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陜西諾威利華生物科技有限公司;武漢中拓康明生物科技有限公司;陜西溯源農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司;黃光東
• 主分類號(hào): C12N15/866
• 分類號(hào): C12N15/866;C12N15/66;A61K39/187;A61P31/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種豬用疫苗載體，其特征在于：所述載體的制備方法包括以下步驟：

1)克隆豬IgG Fc基因和豬瘟病毒E2基因，與桿狀病毒表面展示載體連接，獲得重組轉(zhuǎn)移載體；

2)重組轉(zhuǎn)移載體通過Tn7轉(zhuǎn)座獲得重組桿狀病毒Bacmid載體；

3)重組Bacmid用脂質(zhì)體方法轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞，收集培養(yǎng)物上清，獲得重組桿狀病毒；

4)重組桿狀病毒感染昆蟲細(xì)胞，收集細(xì)胞做Western blot分析和共聚焦顯微鏡分析；

5)重組桿狀病毒做補(bǔ)體拮抗活性檢測；

6)重組桿狀病毒豬瘟載體在豬體做疫苗效力檢驗(yàn)；

所述的步驟1)中豬IgG Fc基因序列為序列表中的SEQ ID NO:1；

所述的步驟1)中豬瘟病毒E2基因序列為序列表中的SEQ ID NO:2；

所述的步驟1)中豬瘟病毒E2基因的表達(dá)受CMV啟動(dòng)子的控制；

所述的步驟1)中桿狀病毒表面展示載體為VSVG假型化桿狀病毒；

所述重組桿狀病毒使用的桿狀病毒表面展示載體利用VSVG的TM和CTD替換了gp64的TM和CTD，提高了對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和對(duì)血清補(bǔ)體的拮抗能力。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬用疫苗載體，其特征在于：所述的步驟2)中Bacmid載體含苜蓿銀文夜蛾核型多角體病毒基因組。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬用疫苗載體，其特征在于：所述的步驟3)中昆蟲細(xì)胞為草地夜蛾卵巢細(xì)胞sf9。