[發明專利]一種絲素-短肽凝血微球的制備方法

有效

• 申請號: 201810934442.1
• 申請日: 2018-08-16
• 公開（公告）號: CN109157672B
• 公開（公告）日: 2020-06-23
• 發明（設計）人: 楊明英;帥亞俊;錢昱;王玨;王鵬
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61L24/10
• 分類號: A61L24/10;A61L24/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 林超

1.一種絲素-短肽凝血微球，其特征在于：所述微球是由絲素和短肽復合而成；

所述的短肽為TI或者LD，短肽TI和LD的氨基酸序列分別為TRYLRIHPQSQVHQI、LPCDYYGTCLD；

絲素-短肽凝血微球既能用于外部創傷，又能用于注射。

2.一種絲素-短肽凝血微球的制備方法，其特征在于：所采用的具體制備步驟如下：

（1）將蠶繭脫膠后形成的纖維狀絲素溶解在中性鹽溶液中，經過過濾、透析、濃縮后獲得0.2%－5%的絲素蛋白溶液；

（2）將步驟（1）中的絲素蛋白溶液與短肽按重量分數比為200：1-9：1的比例混合均勻，用移液槍注入無水乙醇，使得乙醇終濃度為10%-50%，并混合均勻待其自組裝一段時間，使用超聲儀超聲1-10min；

所述的步驟（2）中的短肽為TI或者LD，短肽TI和LD的氨基酸序列分別為TRYLRIHPQSQVHQI、LPCDYYGTCLD；

（3）將步驟（2）得到的溶液在-20攝氏度中冷凍24h；

（4）將步驟（3）中的溶液取出后使融化為乳白色溶液，經第一次離心后倒去上清液得到絲素蛋白顆粒，再經第二次離心后用去離子水洗滌兩次，兩次離心后超聲，接著再進行第三次離心，然后棄去底部沉淀從而得到單分散性較好的絲素蛋白微球懸浮液，用超聲儀超聲3min；

（5）將步驟（4）中得到的懸浮液立刻放入-20攝氏度冰箱，冷凍24h；

（6）取出冷凍好的懸浮液，在冷凍干燥機中冷凍干燥24h，所得即為絲素短肽微球粉末。

3.根據權利要求2所述的一種絲素-短肽凝血微球的制備方法，其特征在于，

所述步驟（4）中，第一次離心以8000rpm的速度離心15min，第二次離心的離心速和第一次離心相同，第三次離心以500rpm的離心速度離心15min。

4.根據權利要求2所述的一種絲素-短肽凝血微球的制備方法，其特征在于，

所述的中性鹽溶液為9mol/L的LiBr溶液、質量分數為50%的氯化鈣溶液。

5.根據權利要求2所述的一種絲素-短肽凝血微球的制備方法，其特征在于，

所述方法制成的絲素-短肽凝血微球既能用于外部創傷，又能用于注射。