[發(fā)明專(zhuān)利]基于UPLC及一測(cè)多評(píng)法的白芷藥材中香豆素類(lèi)成分含量檢測(cè)

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810927260.1
• 申請(qǐng)日: 2018-08-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110824029A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-02-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬逾英;馬俊;曹赟;蔣桂華;陳玲;連艷;劉曉芬
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 成都中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 成都高遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

本發(fā)明提供了一種白芷藥材中香豆素類(lèi)成分的UPLC檢測(cè)方法。本發(fā)明的白芷藥材中香豆素類(lèi)成分的UPLC檢測(cè)方法，基于“一測(cè)多評(píng)法”能同時(shí)檢測(cè)白芷藥材中香豆素類(lèi)成分中的4種成分，且本法相較于常用的HPLC檢測(cè)方法穩(wěn)定性更好，準(zhǔn)確度更高，檢測(cè)時(shí)間更短，效率更高，降低了檢測(cè)成本?？朔嗽谌狈Ξ悮W前胡素、氧化前胡素、水合氧化前胡素對(duì)照品的情況下，通過(guò)相對(duì)校正因子f及色譜峰定位計(jì)算其含量，實(shí)現(xiàn)白芷中主要香豆素成分異歐前胡素、氧化前胡素、水合氧化前胡素的含量測(cè)定，為白芷質(zhì)量控制提供了新方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明具體涉及基于UPLC及一測(cè)多評(píng)法的白芷藥材中香豆素類(lèi)成分含量檢測(cè)。

背景技術(shù)

白芷為傘形科植物白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.etHook.f.或杭白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.etHook.f.var.formosana(Boiss.)Shan et Yuan的干燥根，使用歷史悠久，臨床上用于感冒頭痛，眉棱骨痛，鼻塞流涕，鼻鼽，鼻淵，牙痛，帶下，瘡瘍腫痛等證。研究表明白芷主要活性成分為香豆素類(lèi)，主要有歐前胡素、異歐前胡素、氧化前胡素、水合氧化前胡素、白當(dāng)歸素、白當(dāng)歸腦、佛手柑內(nèi)酯等。

目前，對(duì)白芷香豆素類(lèi)化合物的研究也比較成熟，由最初簡(jiǎn)單的定性分析，逐步發(fā)展為采用精密儀器與方法進(jìn)行定量的分析與研究，如TLC、UV、 HPLC等。目前關(guān)于白芷藥材中香豆素類(lèi)成分含量測(cè)定已有許多報(bào)道，但是都是基于HPLC及外標(biāo)法測(cè)定的，如王夢(mèng)月.白芷的古今藥用概況及香豆素成分研究[D].成都:成都中醫(yī)藥大學(xué)，2003.33‐39.，用HPLC外標(biāo)法測(cè)定了川白芷中主要香豆素類(lèi)成分歐前胡素、異歐前胡素、水合氧化前胡素，但是其檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、效率不高。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明建立了一種新的白芷藥材香豆素類(lèi)成分的檢測(cè)方法，具體是基于UPLC及白芷藥材中香豆素類(lèi)成分含量檢測(cè)方法。

本發(fā)明基于UPLC的白芷藥材中香豆素類(lèi)成分含量檢測(cè)方法，它包括如下操作步驟：

1)對(duì)照品溶液的制備：取香豆素類(lèi)成分，用甲醇配制成對(duì)照品溶液；

2)供試品溶液的制備：取待測(cè)樣品，甲醇提取，得供試品溶液；

3)檢測(cè)：采用UPLC色譜法檢測(cè)，色譜條件如下：色譜柱：C₁₈色譜柱；流動(dòng)相:流動(dòng)相包括A相和B相，A相為乙腈，B相為純水，梯度洗脫，梯度洗脫的程序如下：0～2min，35％A；2～3min，35％～40％A；3～6min， 40％～50％A；6～9min，50％～57％A；9～11min，57％～58％A；11～12min， 58％～70％A；12～15min，70％～90％A；15～16min，90％～100％A；檢測(cè)波長(zhǎng)：305nm。

步驟1)中，所述香豆素類(lèi)成分為歐前胡素、氧化前胡素、異歐前胡素和/或水合氧化前胡素。優(yōu)選地，所述對(duì)照品溶液為每1mL含11.9μg歐前胡素、14.7μg氧化前胡素、10.4μg異歐前胡素和/或5.5μg水合氧化前胡素的溶液。

步驟2)中，甲醇提取的方法為：取待檢樣品，加入70～110倍v/w的甲醇，超聲提取0.5～2h，濾過(guò)，取續(xù)濾液。優(yōu)選地，所述甲醇的用量為待檢樣品90倍；超聲提取的時(shí)間為1h。

步驟3)中，所述C₁₈色譜柱為Agilent Poroshell 120EC‐C_18,，Kinetex XB C18、CORTECSTM C18，優(yōu)選Agilent Poroshell 120EC‐C18。

步驟3)中，所述的色譜條件的柱溫為26～34℃,優(yōu)選30℃；所述的色譜條件的流速為0.95mL·min^‐1～1.05mL·min^‐1,優(yōu)選1.00mL·min^‐1。