[發(fā)明專(zhuān)利]基于UPLC及一測(cè)多評(píng)法的白芷藥材中香豆素類(lèi)成分含量檢測(cè)

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810927260.1
• 申請(qǐng)日: 2018-08-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110824029A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-02-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬逾英;馬俊;曹赟;蔣桂華;陳玲;連艷;劉曉芬
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 成都中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 成都高遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

1.一種基于UPLC的白芷藥材中香豆素類(lèi)成分含量檢測(cè)方法，其特征在于：它包括如下操作步驟：

1)對(duì)照品溶液的制備：取香豆素類(lèi)成分，用甲醇配制成對(duì)照品溶液；

2)供試品溶液的制備：取待測(cè)樣品，甲醇提取，得供試品溶液；

3)檢測(cè)：采用UPLC色譜法檢測(cè)，色譜條件如下：色譜柱：C₁₈色譜柱；流動(dòng)相:流動(dòng)相包括A相和B相，A相為乙腈，B相為純水，梯度洗脫，梯度洗脫的程序如下：0～2min，35％A；2～3min，35％～40％A；3～6min，40％～50％A；6～9min，50％～57％A；9～11min，57％～58％A；11～12min，58％～70％A；12～15min，70％～90％A；15～16min，90％～100％A；檢測(cè)波長(zhǎng)：305nm。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含量檢測(cè)方法，其特征在于：步驟1)中，所述香豆素類(lèi)成分為歐前胡素、氧化前胡素、異歐前胡素和/或水合氧化前胡素。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含量檢測(cè)方法，其特征在于：所述對(duì)照品溶液為每1mL含11.9μg歐前胡素、14.7μg氧化前胡素、10.4μg異歐前胡素和/或5.5μg水合氧化前胡素的溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含量檢測(cè)方法，其特征在于：步驟2)中，甲醇提取的方法為：取待檢樣品，加入70～110倍v/w的甲醇，超聲提取0.5～2h，濾過(guò)，取續(xù)濾液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含量檢測(cè)方法，其特征在于：所述甲醇的用量為待檢樣品90倍；超聲提取的時(shí)間為1h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含量檢測(cè)方法，其特征在于：步驟3)中，所述C₁₈色譜柱為Agilent Poroshell 120EC-C_18,，Kinetex XB C18、CORTECSTM C18，優(yōu)選AgilentPoroshell 120EC-C18。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含量檢測(cè)方法，其特征在于：步驟3)中，所述的色譜條件的柱溫為26～34℃,優(yōu)選30℃；所述的色譜條件的流速為0.95mL·min^-1～1.05mL·min^-1,優(yōu)選1.00mL·min^-1。

8.根據(jù)權(quán)利要求1～7任意一項(xiàng)所述的含量檢測(cè)方法，其特征在于：它是采用一測(cè)多評(píng)的方法進(jìn)行檢測(cè)，以歐前胡素、氧化前胡素、異歐前胡素和水合氧化前胡素中的任意一種為內(nèi)參物，先檢測(cè)內(nèi)參物的含量，使用相對(duì)校正因子計(jì)算待測(cè)樣品中其余香豆素類(lèi)成分的含量。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的含量檢測(cè)方法，其特征在于：所述相對(duì)校正因子按照下述方法得到：

取歐前胡素、氧化前胡素、異歐前胡素、水合氧化前胡素對(duì)照品，根據(jù)權(quán)利要求1、3～7任意一項(xiàng)所述方法檢測(cè)，根據(jù)如下公式計(jì)算：

式中A為對(duì)照品色譜峰面積、W為對(duì)照品的質(zhì)量濃度，下標(biāo)n代表待測(cè)成分對(duì)照品，下標(biāo)s代表內(nèi)參物對(duì)照品。

10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的含量檢測(cè)方法，其特征在于：以歐前胡素為內(nèi)參物，歐前胡素與氧化前胡素的相對(duì)校正因子為0.928，歐前胡素與異歐前胡素的相對(duì)校正因子為0.853，歐前胡素與水合氧化前胡素的相對(duì)校正因子為1.069。