[發明專利]一種協同鏈黑菌素制備抗腫瘤納米組合藥物的方法

有效

• 申請號: 201810923981.5
• 申請日: 2018-08-11
• 公開（公告）號: CN108703958B
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 關統偉;歐夢瑩
• 申請（專利權）人: 西華大學
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61K9/51;A61K47/02;A61K47/22;A61K31/4709;A61K31/445;A61P35/00
• 代理公司: 四川君士達律師事務所 51216
• 代理人: 芶忠義

1.一種協同鏈黑菌素制備抗腫瘤納米組合藥物的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、載體的制備

(1)MSNs的制備

首先利用間苯二酚-甲醛樹脂、福爾馬林水溶液和NaOH水溶液制得酚醛樹脂；然后將模板劑三嵌段共聚物PluronicF127溶解于蒸餾水中得到濃度為2％～10％的模板劑水溶液，并將pH調至6～8；在調節了pH值的模板劑水溶液中加入制得的酚醛樹脂，在60℃下以320rpm攪拌1.5～2h，然后加入40mL水，反應12～14小時；將得到的溶液用3倍體積的水稀釋，再轉移到高壓釜中，115℃下加熱24小時，最后將所得產物進行離心收集，并用蒸餾水洗滌后干燥得到孔徑為3～5nm的MSNs；

(2)雙層介孔的碳-氧化硅復合核-殼結構納米球的合成

采用法在MSNs上涂覆一層無孔二氧化硅殼(nSiO₂)，然后采用表面活性劑輔助的溶膠-凝膠法在氨溶液中涂覆一層介孔二氧化硅，最后，用弱堿性溶液選擇性蝕刻中間無定形二氧化硅層，獲得均勻的棘狀核-殼納米結構，在600℃下，N₂氣中煅燒，使內部聚合物芯碳化，得到納米球載體；

步驟二、載體的表面修飾

(1)載體的表面氧化

用體積比為3∶1的H₂SO4和HNO₃制成的高濃度強酸處理納米球載體，并用水洗滌至中性，再真空干燥得氧化載體，然后通過二亞胺活化的酰胺化反應將聚乙烯亞胺共價鍵接合到氧化后的納米球載體上；

在氧化載體上接枝聚乙烯亞胺的方法為：將20mg氧化的載體分子溶解于2-(4-嗎啉代)乙磺酸的40mL緩沖水溶液中，25℃下加入EDC和NHS后放置0.5小時；將分散在2-(4-嗎啉代)乙磺酸溶液中的PEI加入到活化的氧化載體溶液中，在25℃下攪拌24小時，使PEI共價鍵接合到氧化后的納米載體球上；最后，用水重復洗滌材料數次，除去過量的EDC、NHS和PEI，并在60℃下將PEI接枝的載體真空干燥12小時；

(2)連接來那度胺分子

準備兩份二甲基亞砜溶液，在其中一份中混合來那度胺，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺，25℃下攪拌0.5小時形成溶液A，同時，將連接了PEI的氧化載體分子分散在另一份DMSO中形成溶液B，然后，將溶液B加入到溶液A中，攪拌，再將得到的固體離心并依次用DMSO、水和乙醇洗滌，最后在60℃下真空干燥12小時；其中，PEI是聚乙烯亞胺的簡稱，DMSO是二甲基亞砜的簡稱；

步驟三、抗腫瘤組合藥物的上載

將納米顆粒載體懸浮于含磷酸鹽緩沖液的STN水溶液中，然后在黑暗中攪拌，離心收集納米顆粒，并用緩沖液洗滌直至上清液變為無色，之后進行過濾、干燥；將干燥后含有STN分子的納米顆粒載體懸浮于含磷酸鹽緩沖液的TEMPOL水溶液中，然后在黑暗中攪拌，離心收集納米顆粒，并用緩沖液洗滌直至上清液變為無色，再次進行過濾、干燥得到顆粒狀產物。