[發(fā)明專利]一種低免疫原性、可誘導凋亡的IPS細胞制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810916134.6 | 申請日: | 2018-08-13 |
| 公開(公告)號: | CN108998419A | 公開(公告)日: | 2018-12-14 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 顧雨春;吳理達;尹樂;譚聲江 | 申請(專利權(quán))人: | 北京呈諾醫(yī)學科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N5/10 | 分類號: | C12N5/10;C12N15/62;C12N15/85;C12N15/867 |
| 代理公司: | 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227 | 代理人: | 溫可睿;趙青朵 |
| 地址: | 101111 北京市大興區(qū)北京經(jīng)*** | 國省代碼: | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 凋亡 受控 基因修飾 免疫原性 敲除 制備 單克隆細胞株 基因工程技術(shù) 免疫原性降低 細胞免疫原性 低免疫原性 融合蛋白 細胞保持 誘導凋亡 基因組 回輸 修飾 分化 細胞 | ||
1.基因修飾的iPS細胞,其表達FKBP-Caspase9融合蛋白,且不表達B2M蛋白。
2.權(quán)利要求1所述iPS細胞的制備方法,其特征在于,采用Cas9技術(shù)敲除iPS細胞的B2M基因;采用慢病毒感染法或定點敲入技術(shù)使iPS細胞表達FKBP-Caspase9融合蛋白。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述B2M基因的敲除采用含有SEQ IDNO.1所示序列的載體。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述FKBP-Caspase9融合蛋白表達基因的序列如SEQ ID NO.2所示。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述慢病毒感染法的慢病毒表達載體為pLenti-CMV/To-Neo。
6.靶向敲除iPS細胞B2M基因的Cas9/gRNA載體,其特征在于,含有SEQ ID NO.1所示的序列。
7.FKBP-Caspase9融合蛋白的慢病毒表達載體,其特征在于,含有SEQ ID NO.2所示的序列。
8.權(quán)利要求1的iPS細胞在制備用于細胞治療的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
9.一種用于細胞治療的產(chǎn)品,其特征在于,包含權(quán)利要求1所述的iPS細胞。
10.一種低致瘤風險的細胞治療方法,其特征在于,
給予權(quán)利要求1所述的iPS細胞,當發(fā)生腫瘤化風險時給予AP1903。
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