[發(fā)明專利]一種準(zhǔn)確高效的單一試劑的低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810911785.6
• 申請日: 2018-08-10
• 公開（公告）號: CN109097436A
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 羅維曉;胡曉飛;包興艷;王美麗
• 申請（專利權(quán)）人: 山東博科生物產(chǎn)業(yè)有限公司
• 主分類號: C12Q1/60
• 分類號: C12Q1/60;C12Q1/26;C12Q1/28;C12Q1/44
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• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明涉及低密度脂蛋白膽固醇檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種準(zhǔn)確高效的單一試劑的低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑，其中試劑R中包含50 mmol/L?100 mmol/L的緩沖液，5g/L的氯化鎂多聚陰離子，1g/L?5g/L的糖類環(huán)狀物，0.1g/L?1g/L的HDAOS（N?(2?羥基?3?磺丙基)?3,5?二甲基氧基苯胺鈉鹽），0.1g/L?1g/L的表面活性劑1，0.1g/L?1g/L的表面活性劑2，5g/L?10g/L的表面活性劑3，1KU/L?5KU/L的抗壞血酸氧化酶，1KU/L?3KU/L的膽紅素氧化酶，1KU/L?3KU/L的膽固醇脂酶，0.5KU/L?3KU/L的膽固醇氧化酶，1KU/L?3KU/L的過氧化物酶，0.1g/L?0.3g/L的4?AA，1mL/L?3mL/L的防腐劑組成，具有方便簡單，準(zhǔn)確高效的優(yōu)點。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及低密度脂蛋白膽固醇檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種準(zhǔn)確高效的單一試劑的低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑。

背景技術(shù)

膽固醇在血液中以脂蛋白的形式存在。血漿中低密度脂蛋白(LDL)是運輸內(nèi)源性膽固醇的主要載體，LDL 通過結(jié)合其細(xì)胞膜上的低密度脂蛋白受體(LDL-R) 被降解和轉(zhuǎn)化。

低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）濃度與冠心病的發(fā)病率有明顯正相關(guān)，LDL-C成為評價個體冠心病發(fā)生的危險因素的一個重要指標(biāo)，現(xiàn)已證實，LDL-C 水平與動脈粥樣硬化 、冠心病的發(fā)生呈正相關(guān)。美國國家膽固醇教育計劃(NCEP )將LDL-C作為首要解決分析因子，并以LDL-C 水平作為決策依據(jù)，確定高膽固醇患者是否需要限制飲食或進(jìn)行藥物治療。

隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，LDL-C的測定方法也在不斷發(fā)展，目前在臨床工作中比較簡便實用且應(yīng)用較廣的LDL-C測定方法有均相法、β-定量法、聚乙烯硫酸（PVS）選擇性沉淀法、公式計算法，不同的方法各有優(yōu)缺。其中，β-定量法是超離心結(jié)合選擇沉淀法，該方法具有良好的準(zhǔn)確性，是公認(rèn)的CDC參考方法，但是該方法需要經(jīng)過超離心、選擇性沉淀等步驟，操作復(fù)雜，一般只能應(yīng)用在參考實驗室，無法廣泛應(yīng)用到一般臨床醫(yī)院；聚乙烯硫酸（PVS）選擇性沉淀法容易受到高VLDL的干擾；公式計算法實質(zhì)上不需要測量低密度脂蛋白膽固醇含量，而是通過總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇以及甘油三酯的含量進(jìn)行計算，該方法一則受到其他三項結(jié)果的影響，二則對于異常樣本準(zhǔn)確性計算存在較大差異。目前臨床使用最為普遍的為均相法，該方法不需要對血清樣本進(jìn)行處理而是可以直接進(jìn)行檢測，而均相法又可分為免疫透射比濁法、清除法、杯芳烴法、可溶性反應(yīng)法、保護(hù)性試劑法等方法。

均相法檢測血液中低密度脂蛋白膽固醇具有簡單、迅速、靈敏度都較好且抗干擾能力強(qiáng)、無須樣本預(yù)處理、可進(jìn)行自動化分析等優(yōu)點，但是目前臨床應(yīng)用中所使用的低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑均為雙試劑或多試劑組成，占用了設(shè)備更多的空間，降低了使用的便利性，為提高產(chǎn)品方便實用性，發(fā)明了一種單一試劑的低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑，具有方便快捷、準(zhǔn)確高效的優(yōu)點。

發(fā)明內(nèi)容

一種準(zhǔn)確高效的單一試劑的低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑選擇添加特異性強(qiáng)的表面活性劑、多聚陰離子以及糖類環(huán)狀物質(zhì)，多聚陰離子和糖類環(huán)狀物質(zhì)能快速有效的抑制被測樣本中VLDL、CM和HDL-C三種物質(zhì)的解離，具有特異性的表面活性劑能夠有效激活低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）解離，而對于LDL-C以外的VLDL、CM和HDL-C有較好的抑制解離作用，此時被測樣本中被特異性解離出來的LDL-C通過膽固醇脂酶和膽固醇氧化酶的催化生成H₂O₂, 參與 Trinder反應(yīng)而顯色, 因其他脂蛋白的膽固醇分子已被有效抑制不參與反應(yīng), 顯色程度與 LDL-C的量呈正比例，從而計算LDL-C的含量。

一種準(zhǔn)確高效的單一試劑的低密度脂蛋白膽固醇檢測試劑，所述試劑R組成如下：

緩沖液_{··············································}50mmol/L-100 mmol /L，