[發明專利]一種高效提取干細胞因子的方法在審
| 申請號： | 201810903864.2 | 申請日： | 2018-08-09 |
| 公開（公告）號： | CN110818788A | 公開（公告）日： | 2020-02-21 |
| 發明（設計）人： | 高飛 | 申請（專利權）人： | 蘇州邁斯特細胞生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/475 | 分類號： | C07K14/475;C12N5/074 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 215000 江蘇省蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 高效 提取 干細胞 因子 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種高效提取干細胞因子的方法，其特征在于其步驟為：
（1）、將人工誘導多能性干細胞放置在直經為8.55厘米的細胞培養皿內培養，使得人工誘導多能性干細胞覆蓋掉細胞培養皿底面積的85%；
（2）、將步驟（1）所述細胞培養皿中的培養基吸出，使用1-3毫升磷酸鹽緩沖液（PBS）對細胞培養皿進行清洗，然后將磷酸鹽緩沖液吸出；
（3）、向細胞培養皿中加入0.5-1毫升細胞分裂素（CTK）后搖均勻，常溫下靜止30-120秒，在此期間，至少拍打細胞培養皿一次；
（4）、在顯微鏡下觀察，待基底細胞剝離后，加入3毫升PBS進行清洗，然后將PBS吸出，重復上述加入PBS操作4次，在顯微鏡下觀察，確保細胞剝離液完全被洗凈，然后將PBS徹底吸出；
（5）、向細胞培養皿中加入人工誘導多能性干細胞培養液2毫升，然后用細胞刷將人工誘導多能性干細胞刷離培養皿；
（6）、使用1毫米長槍頭將步驟（5）中制備出的人工誘導多能性干細胞吸入接著吹出，反復吹吸6次，在顯微鏡下觀察，將大小在65微米內的人工誘導多能性干細胞塊即完成了高效提取干細胞因子。
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