[發(fā)明專利]一種抗心肌肌鈣蛋白抗體修飾并載有miR-21的脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810898620.X
• 申請日: 2018-08-08
• 公開（公告）號(hào): CN108815535B
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 彭海生;杜智敏;李明慧;劉肖瑩;唐淑坤;唐雪楓;扈丹丹;張長梅;劉云翠
• 申請（專利權(quán)）人: 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K47/68
• 分類號(hào): A61K47/68;A61K47/69;A61K31/7105;A61P9/10
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;馬鑫

1.一種抗心肌肌鈣蛋白(cTnT)抗體修飾并載有miR-21的脂質(zhì)體，其特征在于，所述的抗心肌肌鈣蛋白抗體修飾并載有miR-21的脂質(zhì)體是通過由DSPE-PEG修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體包載miR-21后，再在表面偶聯(lián)抗cTnT抗體得到的；

所述的抗心肌肌鈣蛋白抗體修飾并載有miR-21的脂質(zhì)體是通過以下步驟制備得到：

(1)載有miR-21的并由DSPE-PEG修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體的制備

將蛋黃磷脂酰膽堿(EPC)、膽固醇(CHO)和DSPE-PEG按照摩爾比為(30-50)：(10-30)：(1-5)用無水乙醇溶解在蒸發(fā)燒瓶中，通過在減壓條件下蒸發(fā)該混合物形成薄的脂質(zhì)膜；用含有miR-21的DEPC生理鹽水溶液水化該脂質(zhì)膜；通過超聲處理使脂質(zhì)體溶液分散，并通過聚碳酸酯膜擠出，得到載有miR-21的并由DSPE-PEG修飾的長循環(huán)脂質(zhì)體，命名為miR-21-LIP，將脂質(zhì)體樣品保存在4℃，備用；

(2)含有抗cTnT抗體膠束溶液的制備

將抗cTnT抗體和DSPE-PEG-馬來酰亞胺分別溶于HEPES溶液中，然后混合，放入4℃冰箱中孵育，得到含有抗cTnT抗體的膠束溶液，命名為Anti-cTnT Ab-DSPE-PEG，保存在4℃，待用；

(3)抗cTnT抗體修飾的脂質(zhì)體制備

將步驟(2)制備的Anti-cTnT Ab-DSPE-PEG膠束溶液與步驟(1)制備的miR-21-LIP脂質(zhì)體溶液在37℃溫育2-4小時(shí)，制備得到抗cTnT抗體修飾的miR-21-LIP，命名為Anti-cTnT-PEG/miR-21-LIP，即為抗心肌肌鈣蛋白抗體修飾并載有miR-21的脂質(zhì)體。

2.如權(quán)利要求1所述的抗心肌肌鈣蛋白抗體修飾并載有miR-21的脂質(zhì)體，其特征在于，步驟(1)中EPC，CHO和DSPE-PEG的摩爾比為36：10：1。

3.如權(quán)利要求1所述的抗心肌肌鈣蛋白抗體修飾并載有miR-21的脂質(zhì)體，其特征在于，步驟(1)中所述的DSPE-PEG為DSPE-PEG-2000；步驟(2)中所述的DSPE-PEG-馬來酰亞胺為DSPE-PEG2000-馬來酰亞胺。

4.如權(quán)利要求1所述的抗心肌肌鈣蛋白抗體修飾并載有miR-21的脂質(zhì)體，其特征在于，步驟(3)中Anti-cTnT Ab-DSPE-PEG與步驟(1)中miR-21-LIP脂質(zhì)體的體積比為(1-10)：(1-10)。

5.如權(quán)利要求4所述的抗心肌肌鈣蛋白抗體修飾并載有miR-21的脂質(zhì)體，其特征在于，步驟(3)中Anti-cTnT Ab-DSPE-PEG與步驟(1)中miR-21-LIP脂質(zhì)體的體積比為1：2。

6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的抗心肌肌鈣蛋白抗體修飾并載有miR-21的脂質(zhì)體在制備治療由心肌缺血引起的心肌梗死的藥物中的應(yīng)用。