[發(fā)明專利]一種巨細胞病毒抗體IgM的檢測試劑盒

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810883445.7
• 申請日: 2018-08-06
• 公開（公告）號: CN109001468A
• 公開（公告）日: 2018-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 宣生良
• 申請（專利權(quán)）人: 一滴準生物科技（常州）有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569;G01N33/543;G01N33/58
• 代理公司: 上海怡恩專利代理事務(wù)所(普通合伙) 31336
• 代理人: 牟俊玲

本發(fā)明公開了一種巨細胞病毒等抗體IgM的檢測試劑盒，屬于檢測試劑技術(shù)領(lǐng)域。它包括復(fù)合微珠懸浮液、熒光顯示劑、樣本稀釋液和洗滌液，生產(chǎn)工藝按照制備微珠保存液、微球的活化與包被、制備熒光標記物和制備濃縮洗滌液進行生產(chǎn)，并結(jié)合校準品1、校準品2、校準品3、參考微球和NSC微球?qū)φ掌返奶囟乖鉀Q了當檢測一個樣本中的弓形蟲、風(fēng)疹、巨細胞病毒和單純皰疹病毒1型和單純皰疹病毒2型時，需要單獨的用四種檢測試劑分別對弓形蟲、風(fēng)疹、巨細胞病毒、單純皰疹病毒1型和單純皰疹病毒2型進行檢測的問題，縮短了檢測時間，從而提高了檢測效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種巨細胞病毒等抗體IgM的檢測試劑盒，屬于檢測試劑技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明是一種可以在一個微孔中，同時測定一個樣本中的弓形蟲，風(fēng)疹病毒，巨細胞病毒，單純皰疹病毒1型、單純皰疹病毒2型IgM抗體的檢測試劑盒。

背景技術(shù)

弓形蟲、風(fēng)疹、巨細胞病毒、單純皰疹病毒1型、單純皰疹病毒2型是當今社會常見的病毒，然而隨著醫(yī)療水平的進步，弓形蟲、風(fēng)疹、巨細胞病毒和單純皰疹病毒1型和單純皰疹病毒2型都能通過現(xiàn)有的檢測試劑進行檢測，然后再做進一步的治療，然而當檢測一個樣本中的弓形蟲、風(fēng)疹、巨細胞病毒和單純皰疹病毒1型和單純皰疹病毒2型時，需要單獨的用四種檢測試劑分別對弓形蟲、風(fēng)疹、巨細胞病毒和單純皰疹病毒1型和單純皰疹病毒2型進行檢測，增加了檢測時間，降低了檢測效率。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于：提供一種巨細胞病毒等抗體IgM的檢測試劑盒，它解決了當檢測一個樣本中的弓形蟲、風(fēng)疹、巨細胞病毒、單純皰疹病毒1型和單純皰疹病毒2型時，需要單獨的用四種檢測試劑分別對弓形蟲、風(fēng)疹、巨細胞病毒、單純皰疹病毒1型和單純皰疹病毒2型進行檢測的問題。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題采取以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：

一種巨細胞病毒等抗體IgM的檢測試劑盒，檢測試劑盒包括復(fù)合微珠懸浮液、熒光顯示劑、樣本稀釋液和洗滌液，

（1）復(fù)合微珠懸浮液：懸浮液中包含有可辨識的聚苯乙烯微珠,聚苯乙烯微珠分別包被有如下抗原：弓形蟲抗原、風(fēng)疹抗原、巨細胞抗原、單純皰疹病毒-1抗原和單純皰疹病毒-2抗原；

（2）熒光顯示劑：使用初始濃度為1.0 ug/mL的藻紅蛋白標記的羊抗-人IgM（特異性γ鏈），稀釋定標為工作液濃度0.6ug/mL，2-8℃儲存；

（3）樣本稀釋液：含磷酸鹽緩沖液，用于稀釋樣本用；

（4）洗滌液：含磷酸鹽緩沖液，需用純化水10倍稀釋，洗板用。

作為優(yōu)選實例，試劑盒的生產(chǎn)工藝主要有以下幾步：

①制備微珠保存液，微珠保存液主要成分包括：即8.0g/L的NaCl試劑，2.9g/L的Na2HPO4·12H2O試劑，2.4g/L的KCl試劑，2.4g/L的KH2PO4試劑，0.5g/L的Tris試劑，0.5mL/L的Tween20試劑，0.5g/L的Sodium Azide試劑。

②微球的活化與包被，取1mL特定編號微珠加入1.5mL離心管，加入5-50uL EDC（1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽）和5-50uL SuLfo-NHS（N-羥基硫代琥珀酰亞胺）, 加入10-100ug 特定抗原，渦旋混勻30秒，超聲混勻30秒，2-8℃搖勻過夜。

③熒光標記物：藻紅蛋白標記的羊抗-人IgM（特異性γ鏈），初始濃度1μg/mL，用微珠保存液稀釋至工作濃度即可，工作濃度為0.6μg/L。

④濃縮洗滌液：濃縮洗滌液中成分與微珠保存液的成分一致，且濃縮洗滌液各成分濃度為微珠保存液各成分濃度的10倍。