[發明專利]跨膜蛋白脂質體復合物及其導向組裝方法

在審

• 申請號: 201810879912.9
• 申請日: 2018-08-03
• 公開（公告）號: CN110801518A
• 公開（公告）日: 2020-02-18
• 發明（設計）人: 陳文;郭俊凌;周界文
• 申請（專利權）人: 周界文;陳文;郭俊凌
• 主分類號: A61K47/42
• 分類號: A61K47/42;A61K9/127
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 胡丹;徐迅

本發明提供了跨膜蛋白脂質體復合物及其導向組裝方法。具體地，本發明提供了一種脂質體復合物，所述脂質體復合物包括：(a)固相載體C1，所述固相載體C1的表面具有第一結合元件C2；(b)膜層M，所述膜層M包裹所述的固相載體C1；(c)膜蛋白P1，所述的膜蛋白包括胞外區、跨膜區和任選的胞內區；其中，所述脂質體復合物中，所述的膜蛋白的跨膜區位于所述的膜層中，而所述膜蛋白的胞外區裸露在所述膜層外側；并且所述膜蛋白位于所述膜層內側的部分具有第二結合元件P2；所述膜蛋白P1通過第二結合元件P2與所述第一結合元件C2的相互作用結合于所述固相載體C1。

技術領域

本發明涉及將具有生物活性的細胞膜蛋白質定向地組裝在納米顆粒的表面，從而形成大小均一的納米顆粒脂質體復合物。該方法可以使單個納米顆粒脂質體表面擁有統一朝向，高純度，高拷貝數(即每顆納米顆粒所具有的蛋白數)的細胞膜蛋白質。因為該脂質體擁有高純度和高拷貝數的膜蛋白質，從而能夠讓其誘導的免疫應答反應效率以及結合分子的能力呈指數級的增長，能夠在疫苗制備、抗體生產、藥物遞送以及基礎科學研究領域實現突破性的進展。

背景技術

細胞膜蛋白質是生物功能的重要承擔者。其功能包括物質的轉運，信號傳導，細胞的功能識別等。其中將細胞膜蛋白質有規律的呈遞在脂質體的表面來模擬病毒顆粒并激活抗體是當前制藥行業和科研的熱門話題和難點。

傳統的技術是將從細胞中提取的膜蛋白質通過擠壓隨機重組成空心的脂質體。但是在重組過程中，脂質體的大小難以嚴格均一控制，膜蛋白質的朝向也是隨機的，同時脂質體的穩定性也較差。此外，從細胞膜上直接提取膜蛋白質的方法，會把細胞膜表面和膜內部的所有分子都無選擇性地組裝到脂質體表面。這樣低純度的脂質體系統會嚴重降低后續功能實驗的效率。

隨著納米技術的發展，制造可以嚴格控制大小，并擁有規則納米結構的顆粒變得可行。納米顆粒是指納米量級的微觀顆粒。一般，納米尺度的定義為至少在一個維度上小于100納米的顆粒。小于10納米的貴金屬或半導體納米顆粒，電子能級可以產生量子化效應。納米顆粒具有重要的科學研究價值，它搭起了大塊物質和原子、分子之間的橋梁。無機和有機納米顆粒都可以制造出來。由于其特殊的微觀結構，納米顆粒已在生物醫學，光學和電子等領域具有廣泛應用前景，納米顆粒研究目前是材料科學、醫學、物理學、化學等領域的研究熱點。將高純度的膜蛋白質以納米顆粒作為模板內核來組裝脂質體將對該領域的突破起到重要作用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種脂質體復合物，所述脂質體復合物包括：(a)固相載體C1；(b)膜層M；和(c)膜蛋白P1。

本發明的又一目的在于提供將高純度、多拷貝并具有生物活性的與細胞膜融合的膜蛋白質定向地組裝到納米顆粒表面形成脂質體復合物的方法。

在本發明的第一方面，提供了一種脂質體復合物，所述脂質體復合物包括：

(a)固相載體C1，所述固相載體C1的表面具有第一結合元件C2；

(b)膜層M，所述膜層M包裹所述的固相載體C1；

(c)膜蛋白P1，所述的膜蛋白包括胞外區、跨膜區和任選的胞內區；

其中，所述脂質體復合物中，所述的膜蛋白的跨膜區位于所述的膜層中，而所述膜蛋白的胞外區裸露在所述膜層外側；

并且所述膜蛋白位于所述膜層內側的部分具有第二結合元件P2；

所述膜蛋白P1通過第二結合元件P2與所述第一結合元件C2的相互作用結合于所述固相載體C1。

在另一優選例中，所述的膜蛋白包括胞外區、跨膜區和胞內區。

在另一優選例中，所述的相互作用包括：親和作用、鍵合作用、或其組合。

在另一優選例中，所述親和作用包括一種或多種選自下組的作用：