[發明專利]跨膜蛋白脂質體復合物及其導向組裝方法

在審

• 申請號: 201810879912.9
• 申請日: 2018-08-03
• 公開（公告）號: CN110801518A
• 公開（公告）日: 2020-02-18
• 發明（設計）人: 陳文;郭俊凌;周界文
• 申請（專利權）人: 周界文;陳文;郭俊凌
• 主分類號: A61K47/42
• 分類號: A61K47/42;A61K9/127
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 胡丹;徐迅

1.一種脂質體復合物，其特征在于，所述脂質體復合物包括：

(a)固相載體C1，所述固相載體C1的表面具有第一結合元件C2；

(b)膜層M，所述膜層M包裹所述的固相載體C1；

(c)膜蛋白P1，所述的膜蛋白包括胞外區、跨膜區和任選的胞內區；

其中，所述脂質體復合物中，所述的膜蛋白的跨膜區位于所述的膜層中，而所述膜蛋白的胞外區裸露在所述膜層外側；

并且所述膜蛋白位于所述膜層內側的部分具有第二結合元件P2；

所述膜蛋白P1通過第二結合元件P2與所述第一結合元件C2的相互作用結合于所述固相載體C1。

2.如權利要求1所述的脂質體復合物，其特征在于，所述脂質體復合物中固相載體與膜蛋白具有式I結構：

[C1-(C2)s]～(P2-P1)m (I)

式中，

C1為固相載體，其作為所述脂質體復合物的內核，并且外表面具有第一結合元件C2；

P1為膜蛋白，其位于所述膜層內側的部分具有第二結合元件P2，P1通過C1外表面的第一結合元件C2結合于C1；

m為≥1的正整數；

s為≥1的正整數；

且s≥m；

“～”表示第二結合元件P2與所述第一結合元件C2的相互作用；以及

各“-”為鍵。

3.如權利要求1所述的脂質體復合物，其特征在于，所述第二結合元件P2位于所述膜蛋白P1的N端、C端、以及膜層內側不影響膜蛋白功能的任何區域。

4.如權利要求1所述的脂質體復合物，其特征在于，所述第一結合元件C2選自下組：Lysine NTA(Nα,Nα-Bis(carboxymethyl)-L-lysine,分子式C₁₀H₁₈N₂O₆)或其衍生分子、親和素(鏈霉親和素(streptavidin))或其衍生分子、DNA、RNA、PNA(肽核酸)、LNA(鎖核酸)、配體、其它和P2結合的分子、或其組合。

5.如權利要求1所述的脂質體復合物，其特征在于，所述膜層選自下組：模擬的質膜、合成的質膜、從生物體細胞中提取的膜分子、不同膜成分的混合物、或其組合。

6.如權利要求1所述的脂質體復合物，其特征在于，所述膜蛋白選自下組：跨膜蛋白、膜運輸蛋白、離子通道、受體蛋白、外周膜蛋白、內在膜蛋白、脂錨定蛋白、膜蛋白質和膜蛋白質、膜蛋白質和其他蛋白質形成的復合物、或其組合。

7.如權利要求1所述的脂質體復合物，其特征在于，所述第二結合元件P2選自下組：與抗體結合的標簽、與納體結合的標簽、與Ni-NTA結合的組氨酸標簽、與cobalt-NTA結合的組氨酸標簽、與copper-NTA結合的組氨酸標簽、蛋白標簽、生物素、DNA、RNA、PNA(肽核酸)、LNA(鎖核酸)、配體、或其組合。

8.如權利要求1所述的脂質體復合物，其特征在于，所述第二結合元件P2選自下組：His-Tag、鈣調蛋白標簽、E標簽、Myc標簽、NE標簽、S標簽、SBP標簽、Strep標簽、Spot標簽、pilin-C蛋白、Flag標簽、HA標簽、TC標簽、Ty標簽、V5標簽、VSV標簽。

9.一種權利要求1所述脂質體復合物的導向組裝方法，其特征在于，包括步驟：

(1)提供(a)固相載體C1，所述固相載體C1的表面具有第一結合元件C2，以及(b)含膜蛋白P1的復合物(bicelle)，其中所述膜蛋白P1包括胞外區、跨膜區和任選的胞內區，并且所述膜蛋白在對應于所述膜層內側的部分具有第二結合元件P2；

(2)將所述固相載體C1和所述含膜蛋白P1的復合物(bicelle)進行混合，形成第一混合物；

(3)在所述第一混合物中，將所述復合物導向組裝到固相載體C1的表面，從而形成權利要求1所述脂質體復合物；以及

(4)任選地，分離純化得到脂質體復合物。

10.權利要求1所述脂質體復合物的用途，其特征在于，所述用途選自下組：

(i)用于制備一組合物，所述組合物用于呈遞抗原；

(ii)用于篩選和/或制備抗體；

(iii)用于制備疫苗組合物，所述的疫苗組合物含有所述脂質體復合物作為疫苗活性成分；

(iv)用于制備一組合物，所述的組合物用于激活細胞表面的受體；

(v)用于制備藥物組合物，所述藥物組合物用于遞送藥物。