[發明專利]一種異黃酮衍生物的分離方法及應用

在審

• 申請號: 201810871722.2
• 申請日: 2018-08-02
• 公開（公告）號: CN109053667A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發明（設計）人: 沈濤;李妍茹;向蘭;王小寧;婁紅祥
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: C07D311/36
• 分類號: C07D311/36;C07D311/40;A61P11/00;A61P17/00;A61P3/10;A61P35/00;A61P25/28;A23L33/105;A61K8/49;A61Q19/00;A61Q19/08
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

1.一種5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮的分離方法，將紅車軸草投入乙醇溶液中加熱回流提取，濃縮濾液得浸膏；向浸膏中加水混懸溶解后，依次加入石油醚和乙酸乙酯萃取，將乙酸乙酯部分通過硅膠柱層析梯度洗脫后得到無色結晶，即5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮；優選的，具體步驟如下：

(1)將紅車軸草投入乙醇溶液中加熱回流提取，合并濾液后濃縮得到乙醇浸膏；

(2)向步驟(1)得到的乙醇浸膏中加入適量水溶解，得到浸膏液，加入石油醚萃取后，再向所述浸膏液中加入乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯萃取部位；

(3)向所述乙酸乙酯萃取部位加入硅膠攪拌，然后經硅膠柱層析梯度洗脫分離，所述硅膠柱層析的體系為二氯甲烷-甲醇系統，洗脫后得到九個部分，記為Fr.1-Fr.9；

(4)將步驟(3)中得到的Fr4經硅膠柱層析梯度洗脫分離，所述硅膠柱層析的體系為二氯甲烷-甲醇系統，梯度洗脫后得到無色結晶，即5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮。

2.如權利要求1所述的分離方法，其特征在于，步驟(1)中所述紅車軸草投入8倍量75％的乙醇溶液中加熱回流提取3次，每次1.5h。

3.如權利要求1所述的分離方法，其特征在于，步驟(2)中加入所述石油醚萃取三次后，棄去石油醚部位，再加入所述乙酸乙酯萃取三次，合并得到所述乙酸乙酯部位。

4.如權利要求1所述分離方法，其特征在于，步驟(3)中所述硅膠柱層析梯度洗脫的程序為：二氯甲烷-甲醇系統體積比為100:0、95:5、90:10、85:15、80:20、75:25、70:30、60:40、50:50、0:100，洗脫后得到九個部分，記為Fr.1-Fr.9。

5.如權利要求1所述的分離方法，其特征在于，步驟(4)中所述二氯甲烷-甲醇系統梯度洗脫的程序為：93:7、88:12、80:20，在88:12體積比下的餾分有結晶析出，為5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮。

6.5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮在制備預防或治療氧化應激誘發疾病的藥物中的應用；優選的，所述氧化應激誘發疾病為慢性阻塞性肺疾病、呼吸道炎癥、皮膚病變、糖尿病、神經退行性疾病或腫瘤疾病。

7.如權利要求7所述的應用，所述5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮的治療濃度為6.25～12.5μM，優選的，為6.25μM；所述5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮為膠囊劑、片劑、散劑、凝膠劑、顆粒劑、注射劑、口服液、酒劑、丸劑、合劑或酊劑。

8.一種5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮片劑的制備方法，將異黃酮5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮、淀粉及糊精混合后過篩，再加入羧甲基纖維素鈉制粒，然后加入硬脂酸鎂混合后壓片即得片劑；優選的，所述異黃酮5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮、淀粉及糊精質量比為1-2:2-3:2-3。

9.一種5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮凝膠劑的制備方法，將卡波姆和聚山梨醇加入水中混均，再加入異黃酮混合均勻即得凝膠劑；優選的，所述異黃酮5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮、卡波姆和聚山梨醇的質量比為2-3:3-4:1-2。

10.一種具有抗氧化功效的化妝品，成分為5-羥基-4，7’-二甲氧基異黃酮及一般化妝品原料，優選的，所述化妝品為面膜、護膚霜、護膚膏、護膚水、護膚粉或護膚凝膠。