[發明專利]一種快速檢測β-淀粉樣蛋白的量子點免疫層析試紙條與應用

在審

• 申請號: 201810865711.3
• 申請日: 2018-08-01
• 公開（公告）號: CN109187981A
• 公開（公告）日: 2019-01-11
• 發明（設計）人: 萬東山;郭蘭英
• 申請（專利權）人: 萬東山
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/558;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/58;G01N33/532
• 代理公司: 洛陽公信知識產權事務所(普通合伙) 41120
• 代理人: 許菲菲

本發明屬于免疫檢測技術領域，具體涉及一種快速檢測β?淀粉樣蛋白的量子點免疫層析試紙條與應用。所述的快速檢測β?淀粉樣蛋白的量子點免疫層析試紙條，包含設有檢測區和質控區的硝酸纖維素膜、包被量子點微球偶聯Aβ40和Aβ42多克隆抗體的玻璃纖維膜、底板、樣品墊和吸水墊。本發明提供的快速檢測β?淀粉樣蛋白的量子點免疫層析試紙條通過量子點免疫層析技術，可實現一次反應同時檢測Aβ40、Aβ42抗原指標，避免了不同蛋白互相產生交叉的問題，檢測時間短，靈敏度高于酶聯免疫方法10倍以上，特異性強，反應速度快，準確性高，定量準確。

技術領域

本發明屬于免疫檢測技術領域，具體涉及一種快速檢測β-淀粉樣蛋白的量子點免疫層析試紙條與應用。

背景技術

阿爾茨海默病(Alzheimer disease，AD)，由巴伐利亞的神經病理學家阿爾茨海默于1907年首先發現，并以其名字命名，是一種中樞神經系統變性病，起病隱襲，病程呈慢性進行性，主要表現為漸進性記憶障礙、認知功能障礙、人格改變及語言障礙等神經精神癥狀，嚴重影響社交、職業與生活功能。阿爾茨海默病是老年癡呆最常見的一種類型，約占所有癡呆的50～60％，據統計在西方國家，大于或等于85歲年齡組的患病率在24～33％之間，雖然發展中國家缺少權威性和代表性數字統計，但是估計世界上60％的癡呆患者存在于發展中國家。AD的病因及發病機制尚未闡明，特征性病理改變為β-淀粉樣蛋白沉積形成的細胞外老年斑和tau蛋白過度磷酸化形成的神經細胞內神經原纖維纏結，以及神經元丟失伴膠質細胞增生等。因此β-淀粉樣蛋白可以作為阿爾茨海默病為代表的以血管增生為特點的疾病診斷指標。

1930年，Divry用剛果紅對AD病人腦中的損害區域進行能夠染色，成功地使沉積在細胞外的老年斑著色，進而發現老年斑的主要成分是一種嗜剛果紅的淀粉樣蛋白，1984年Glenner等分別成功地完成了對這種蛋白的分離和測序工作，發現此蛋白是由39～43個氨基酸殘基組成，因其具有一個β片層的二級結構，遂命名β-淀粉樣蛋白，簡稱Aβ。腦內Aβ來源于其前體物質β淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor protein，APP)。APP是一種跨膜蛋白質，在體內各種組織廣泛存在，而在腦組織的表達最高，在生理條件下，多數APP由A2分泌酶裂解成可溶性的App肽，App肽在進一步由C2分泌酶裂解產生P3極少部分APP在胞質溶酶體經β2分泌酶和C2分泌酶作用裂解為Aβ，從App代謝為β淀粉樣蛋白過程分為兩步：首先β2分泌酶在Aβ的N末端裂解APP，產生可溶的分泌性的APP衍生物APPS2β和貫穿膜成分的C末端片斷，C末端片斷進一步由C2分泌酶裂解為Aβ，Aβ有40個氨基酸和42個氨基酸2種形式，其中Aβ42容易引起聚集，具有較強的細胞毒性，在某些病理條件下，APP主要經β2分泌酶和C2分泌酶順序剪切產生過多的Aβ導致AD病，C2分泌酶在Aβ產生中起非常重要的作用，決定了產生的Aβ42在其中所占的比例。

β-淀粉樣蛋白(amyloidβ-protein，Aβ)分子量約4KDa，由β淀粉樣前體蛋白(β-amyloid precursor protein，APP)水解而來，循環于血液、腦脊液和腦間質液中，大多與伴侶蛋白分子結合，少數以游離狀態存在。人體內Aβ最常見的亞型是Aβ40和Aβ42。在人腦脊液和血中，Aβ40分別比Aβ42的含量水平高10倍和1.5倍，Aβ42具有更強的毒性，且更容易聚集，從而形成Aβ沉淀的核心，引發神經毒性作用。Aβ的沉積不僅與神經元的退行性病變有關，而且可以激活一系列病理事件，包括星型膠質細胞和小膠質細胞的激活、血腦屏障的破環和微循環的變化等，是AD病人腦內老年斑周邊神經元變性和死亡的主要原因。研究人員認為，β-淀粉樣蛋白在腦神經細胞內部的早期蓄積表明，在腦神經細胞外還未出現β-淀粉樣蛋白蓄積時，阿爾茨海默氏癥就已經出現。這一發現或有助于提早診斷、治療阿爾茨海默氏癥，從而盡可能延緩病情惡化。