[發明專利]一種非小細胞肺癌檢測試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201810865121.0
• 申請日: 2018-08-01
• 公開（公告）號: CN108841962B
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發明（設計）人: 郭弘妍;楊春花;王俊;楊帆;王亞輝;邢婉麗;程京
• 申請（專利權）人: 博奧生物集團有限公司;北京大學人民醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;魏少偉

本發明公開了一種非小細胞肺癌檢測試劑盒及其應用。本發明公開的非小細胞肺癌檢測試劑盒包括檢測9個miRNA(miRNA?hsa?miR?20a、hsa?miR?25、hsa?miR?223、hsa?miR?320、hsa?miR?222、hsa?miR?146a、hsa?miR?191、hsa?miR?24和hsa?miR?130a)、CEA與CYFRA21?1含量的物質。利用本發明的試劑盒能夠很好地篩選非小細胞肺癌，且敏感性高，特異性高，適于篩選非小細胞癌，尤其是早期非小細胞肺癌。因此，可利用這9個miRNA聯合CEA與CYFRA21?1對人群的肺癌風險進行早期預警，提高早診的比例。

技術領域

本發明涉及生物醫學領域中，一種非小細胞肺癌檢測試劑盒及其應用。

背景技術

肺癌是臨床上最常見的惡性腫瘤之一。肺癌主要分為小細胞肺癌和非小細胞肺癌。我國主要的肺癌類型為非小細胞肺癌，約占肺癌患者的80％，主要包括腺癌及鱗癌兩大類型。及時早期發現肺癌患者，早期治療，極有可能提高肺癌患者的生存率、降低死亡率。

目前，常用的肺癌的診斷主要依賴于影像學上發現肺內腫物，包括胸部X片、CT、核磁共振(MRI)等影像學方法，同時結合血清中的腫瘤標志物如癌胚抗原等。但影像學檢查在腫瘤早期診斷中還具有一定的局限性，例如很難發現體積小的腫瘤；CT等放射線檢查方法對患者具有輻射傷害；MRI等精密度高的儀器檢查費用高，預約時間長，普及受限。特別是，影像學檢查對操作者技術要求高，無經驗的人員誤診率高。循環腫瘤生物標志物由于具有無創性，可動態監測等優點，在無癥狀人群腫瘤篩查方面極具應用前景。目前臨床應用的循環腫瘤標志物大多為蛋白、多肽、激素、糖類等，癌胚抗原(CEA)、細胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)是臨床上輔助診斷肺癌的常用腫瘤標志物，對肺癌的輔助診斷具有一定參考價值，但對肺癌的診斷缺乏足夠的敏感性和特異性。因此，發現新的肺癌的腫瘤標志物具有重要意義。

MicroRNA(簡寫為miRNA)是一類在轉錄后水平調節基因表達的長度約為22個核苷酸的真核生物內源性小分子單鏈RNA。已有報道證明miRNA的異常表達與腫瘤的發生、發展密切相關，miRNA起到類似癌基因或抑癌基因一樣的功能。許多研究表明，游離miRNA的表達異常與多種腫瘤、炎癥、感染性疾病有關，顯示了其可作為潛在的疾病包括腫瘤的診斷標志物。研究證實循環miRNA在腫瘤發生早期即發生明顯的異常表達，可用于腫瘤早期診斷，循環miRNA作為腫瘤診斷標志物，具有非侵入、可動態監測的優點，是對早期腫瘤患病診斷技術的良好補充。

目前已有研究報道循環miRNA可作為非小細胞肺癌的標志物，診斷價值較高。但是，不同研究小組大多采用單一的參考miRNA進行數據歸一化，不同的非小細胞肺癌研究篩選的標志物差異較大，某些miRNA的診斷價值在不同的研究報道中變化較大。此外，miRNA與腫瘤蛋白標志物的互補性、對其他組織器官良惡性疾病的特異性等研究鮮有報道。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是如何診斷非小細胞肺癌。

為解決上述技術問題，本發明首先提供了檢測9個miRNA表達量的系統在制備診斷或輔助診斷非小細胞肺癌產品中的應用；

所述9個miRNA為hsa-miR-20a、hsa-miR-25、hsa-miR-223、hsa-miR-320、hsa-miR-222、hsa-miR-146a、hsa-miR-191、hsa-miR-24和hsa-miR-130a。

上述應用中，所述表達量可為絕對表達量或相對表達量。所述相對表達量可為相對于ath-miR159a、hsa-miR1228和/或hsa-miR-16含量的相對表達量，也可為相對于ath-miR159a、hsa-miR1228和hsa-miR-16平均含量的相對表達量。所述表達量可為所述9個miRNA在血漿和/或血清中的表達量。

上述應用中，所述檢測9個miRNA表達量的系統可包括利用定量PCR檢測所述9個miRNA的表達量的系統。