[發明專利]用于治療“女運動員三聯征”和修復女運動員卵巢功能的細胞制劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201810862472.6
• 申請日: 2018-08-01
• 公開（公告）號: CN109010368B
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發明（設計）人: 徐妍;王海亞;郭世磊
• 申請（專利權）人: 徐妍
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61K9/10;A61P1/14;A61P15/00;A61P5/02;A61P19/10;A61P15/08;C12N5/0775
• 代理公司: 南京正聯知識產權代理有限公司 32243
• 代理人: 盧霞

本發明提供了一種用于治療“女運動員三聯征”和修復女運動員卵巢功能的細胞制劑，所述的細胞制劑由被rhSDF?1α和IGF?II充分馴化的間充質干細胞，以及用于承載間充質干細胞的生理鹽水組成，所述的間充質干細胞為臍帶間充質干細胞或胎盤間充質干細胞。該制劑通過靜脈滴注的方式輸入患者體內，通過干細胞的免疫調節作用、激素調節作用等改善女運動員三聯癥的癥狀。本發明可解決患有“女運動員三聯征”的運動員卵巢損傷修復，對運動員的康復起到療效。本發明所提供的制劑制備方法簡單，易于實施，安全有效。

技術領域

本發明屬于運動與健康科學領域，其涉及用于治療“女運動員三聯征”的細胞制劑及其制備方法。

背景技術

“女運動員三聯征”(Female Athlete Triad,FAT)這一概念是在1992年由美國運動醫學會(ACSM提出的)，具體包含進食障礙(攝食紊亂)、下丘腦功能性閉經和骨質疏松。三聯征的三個因素是相互影響的，并且有研究發現，即使是月經稀疏的運動員，其骨密度也非常低。閉經會導致雌激素下降，而雌激素下降和營養不良也會使骨密度降低，影響運動員的健康。而飲食紊亂包括了嚴重的飲食障礙及不典型的飲食紊亂，該問題已經成為了運動員中乃至社會人群中一項嚴重的問題，該癥狀的發生目前認為可能與神經肽Y及瘦素的異常有關，其中關鍵為能量缺失、有時為臨床或亞臨床飲食疾病狀態。而嚴重的飲食紊亂會導致脫水、心率不齊、心搏緩慢、低血壓等癥狀，并會引起焦慮、抑郁等嚴重的神經精神癥狀。骨質疏松癥主要為一種骨骼代謝異常疾病，可導致運動訓練中的骨質疏松性骨折，以及增加了運動中持續性骨應力損傷，從而對運動員的健康狀況產生影響。這三種癥狀之間往往相互關聯，對女運動員的健康及訓練造成影響。干細胞與相關細胞因子聯合應用的技術為女運動員治療“女運動員三聯征”及其相關癥狀開拓了新的方向，具有可觀的臨床應用前景。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是，通過干細胞的免疫調節作用、激素調節作用，提供一種能夠治療和改善“女運動員三聯征”的干細胞制劑及其制備方法。

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案是：

一種用于治療“女運動員三聯征”和修復女運動員卵巢功能的細胞制劑，所述的細胞制劑由被rhSDF-1α和IGF-II充分馴化的間充質干細胞，以及用于承載間充質干細胞的生理鹽水組成，所述的間充質干細胞為臍帶間充質干細胞或胎盤間充質干細胞。生理鹽水為濃度為0.9％的氯化鈉溶液(0.9克氯化鈉/100毫升水)。

所述的間充質干細胞的來源為人臍帶或胎盤；

所述的細胞制劑中，間充質干細胞的濃度為5×10⁶～2×10⁸個/100mL生理鹽水；(優選為5×10⁷個細胞/100ml生理鹽水。)

所述的間充質干細胞為原代-第10代的間充質干細胞。

所述的細胞制劑為混懸液。

所述的細胞制劑的制備方法，包括如下步驟：

1)制備臍帶或胎盤間充質干細胞；

2)制備被rhSDF-1α和IGF-II充分馴化的間充質干細胞：將rhSDF-1α、IGF-II加入上述臍帶或胎盤間充質干細胞的培養基中進行馴化，其中，rhSDF-1α的質量濃度為10-150ng/mL(優選為100ng/mL)；所述的IGF-II的質量濃度為200ng/ml；

3)收集生長狀況良好，生長密度為80-90％的細胞。將細胞通過胰酶進行消化，待細胞懸浮后加入帶有10％FBS的培養基終止消化。將懸浮的細胞收集后置于離心機中，1000轉/6分鐘進行離心，并重復離心清洗；收集離心管底部的細胞，計數后加入生理鹽水中待進行靜脈注射。

所述的臍帶間充質干細胞的制備方法，包括如下步驟：

1)取志愿、健康合格孕婦的足月剖宮產的新生兒臍帶，充分洗滌去除雜質；