[發明專利]一種基于Au@Ag核殼結構比色檢測卡那霉素的方法

有效

• 申請號: 201810859910.3
• 申請日: 2018-08-01
• 公開（公告）號: CN109115711B
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 朱穎越;姜峰;顧翔源;金夢依;賈睿
• 申請（專利權）人: 常熟理工學院
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙) 32249
• 代理人: 楊曉玲

1.一種基于Au@Ag核殼結構比色檢測卡那霉素的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）設計與合成核酸適配體片段；

設計一段能夠對卡那霉素具有特異性親和力而結合的DNA片段，通過DNA合成儀制備序列，DNA：5’-AGA TGG GGG TTG AGG CTA AGC CGA-3’

（2）制備Au@Ag核殼結構納米粒子；

（3）取離心管，將濃度為10nM ～50nM的核酸適配體和濃度為10nM ～50nM的NaCl加入到1500μL的PBS緩沖液中，再加入待測樣品，混合并在室溫下穩定，然后向離心管中加入500μL的Au@Ag核殼結構納米溶液，掃描其紫外可見吸收光譜；

（4）根據線性方程確定樣品中卡那霉素濃度，所述線性方程為：y=0.00011x+0.39901，y為不同卡那霉素濃度下紫外吸收值比率，x為相應卡那霉素的濃度，線性相關性0.995，線性范圍是80-5000 nmol/L，檢測限為60nM。

2.根據權利要求1所述的一種基于Au@Ag核殼結構比色檢測卡那霉素的方法，其特征在于所述步驟（3）中，核酸適配體的濃度為30nM，NaCl的濃度為30nM。

3.根據權利要求1所述的一種基于Au@Ag核殼結構比色檢測卡那霉素的方法，其特征在于所述線性方程對應的標準曲線建立：取10個離心管，將濃度為30nM的核酸適配體和濃度為30nM的NaCl加入到1500μL的PBS緩沖液中，再加入卡那霉素，使其終濃度分別為0 nM、10nM、100 nM、500 nM、1000 nM、2000 nM、4000 nM、5000 nM、6000 nM、7000 nM，混合并在室溫下穩定20min，然后向每個離心管中加入500 μL的Au@Ag核殼結構納米溶液，掃描其紫外可見吸收光譜，根據不同卡那霉素濃度下測定的吸收值繪制卡那霉素濃度的標準曲線，線性范圍是80-5000 nmol/L，檢測限為60nM，標準曲線的線性方程為y=0.00011x+0.39901，y為不同卡那霉素濃度下紫外吸收值比率，x為相應卡那霉素的濃度，線性相關性0.995。

4.根據權利要求1所述的一種基于Au@Ag核殼結構比色檢測卡那霉素的方法，其特征在于所述卡那霉素的特異性測定方法：取5個離心管，將濃度為30 nM的核酸適配體和濃度為30 nM的NaCl加入到1500μL的PBS緩沖液中，向各離心管中分別加入類似物氨芐青霉素、新鏈絲菌素、慶大霉素、四環素和卡那霉素，使加入類似物的最終濃度為3000 nM，混合并在室溫下反應20分鐘，然后向每個離心管中加入500μL的Au@Ag核殼結構納米溶液，混合反應后測量可見光吸收值。