[發(fā)明專利]一種高效準(zhǔn)確的高通量檢測(cè)樣本的質(zhì)量評(píng)估方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810858187.7
• 申請(qǐng)日: 2018-07-31
• 公開（公告）號(hào): CN109239029B
• 公開（公告）日: 2022-06-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 段飛蝶;韓維;漢雨生;揣少坤
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州燃石醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64;G01N21/33
• 代理公司: 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102
• 代理人: 任重

1.一種評(píng)估DNA樣本降解情況的方法，其特征在于，利用熒光染料法和紫外吸收法分別測(cè)量樣品DNA濃度，并計(jì)算兩種測(cè)量方法的比值，

所述比值的計(jì)算方法為：N/Q比值＝使用Nanodrop分光光度計(jì)測(cè)量的樣品DNA濃度/使用Qubit熒光計(jì)測(cè)量的樣品DNA濃度；

當(dāng)0＜N/Q比值≤3.5時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段平均長(zhǎng)度≥2500bp；當(dāng)3.5＜N/Q比值≤6.5時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段平均長(zhǎng)度為1000～2500bp；當(dāng)N/Q比值＞6.5時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段平均長(zhǎng)度≤1000bp。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，使用貨號(hào)Q32854的Qubit dsDNA HS AssayKit結(jié)合Qubit熒光計(jì)進(jìn)行DNA濃度檢測(cè)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，根據(jù)DNA樣本降解情況選擇打斷條件，當(dāng)N/Q比值小于等于3.5時(shí)，機(jī)械打斷60秒；當(dāng)N/Q比值大于3.5時(shí)，機(jī)械打斷30秒。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，當(dāng)0＜N/Q比值≤3.5時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段打斷后的插入片段的預(yù)期大小為200～250bp；當(dāng)3.5N/Q比值≤6.5時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段打斷后的插入片段的預(yù)期大小為170～200bp；當(dāng)N/Q比值6.5時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段打斷后的插入片段的預(yù)期大小為170bp。

5.一種評(píng)估DNA樣本降解情況的方法，其特征在于，利用熒光染料法和紫外吸收法分別測(cè)量樣品DNA濃度，并計(jì)算兩種測(cè)量方法的比值，

所述比值的計(jì)算方法為：Q/N比值＝使用Qubit熒光計(jì)測(cè)量的樣品DNA濃度/使用Nanodrop分光光度計(jì)測(cè)量的樣品DNA濃度；

當(dāng)Q/N比值0.29時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段平均長(zhǎng)度≥2500bp；當(dāng)0.15Q/N比值≤0.29時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段平均長(zhǎng)度為1000～2500bp；當(dāng)Q/N比值0.15時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段平均長(zhǎng)度≤1000bp。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，使用貨號(hào)Q32854的Qubit dsDNA HS AssayKit結(jié)合Qubit熒光計(jì)進(jìn)行DNA濃度檢測(cè)。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于，根據(jù)DNA樣本降解情況選擇打斷條件，當(dāng)Q/N比值大于0.29時(shí)，機(jī)械打斷60秒；當(dāng)Q/N比值小于等于0.29時(shí)，機(jī)械打斷30秒。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，當(dāng)Q/N比值0.29時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段打斷后的插入片段的預(yù)期大小為200～250bp；當(dāng)0.15Q/N比值≤0.29時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段打斷后的插入片段的預(yù)期大小為170～200bp；當(dāng)Q/N比值0.15時(shí)，評(píng)估樣品DNA片段打斷后的插入片段的預(yù)期大小為170bp。