[發明專利]一種高純度銀杏酸的制備方法

有效

• 申請號: 201810845827.0
• 申請日: 2018-07-27
• 公開（公告）號: CN109053417B
• 公開（公告）日: 2021-03-05
• 發明（設計）人: 王岱杰;王曉;陳龍;紀文華;趙恒強;閆慧嬌
• 申請（專利權）人: 山東省分析測試中心
• 主分類號: C07C51/42
• 分類號: C07C51/42;C07C51/47;C07C51/48;C07C65/05
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

1.一種銀杏酸類成分的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將銀杏果外種皮與白果分離，外種皮置于陰涼處干燥，干燥后的外種皮采用石油醚提取三次，得到總銀杏酸提取物；

（2）將總銀杏酸類成分采用pH區帶逆流色譜進行分離和富集，得到相應的組分；

（3）將富集組分進行循環逆流色譜模式分離純化，制得純度高于95%的銀杏酸類單體；

其中，步驟（1）中所述石油醚提取的沸程為60-90℃；

步驟（2）中pH區帶逆流色譜進行分離和富集的具體操作過程為：

a）配制兩相溶劑體系

將正己烷/乙酸乙酯/甲醇/水以體積比2:1:3:1的比例配制成溶劑系統，置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層，分為上下兩相，上相為固定相，下相為流動相；

b）溶解樣品

在上相中加入10 mmol鹽酸當成保留酸，下相加入10 mmol三乙胺當成洗脫堿，取步驟(1) 中提取的總銀杏酸提取物溶解于10 mL酸化的上相和10 mL未堿化的下相；

c)進樣、分離

將半制備型高速逆流色譜儀的進樣閥處于進樣狀態，將固定相用泵以一定流速灌滿色譜分離柱，停泵；開啟速度控制器，使高速流色譜儀的色譜分離柱正轉，轉速達800轉/min時，將溶解好的樣品用注射器注入逆流色譜儀進樣閥中，旋轉進樣閥為接柱狀態，使樣品進入色譜分離柱；設置流動相流速為2.0 mL/min，開始泵流動相，根據檢測器紫外光譜圖接收組分I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和V，其中組分III為總樣中的峰3單體，組分V為總樣中的峰5單體，組分I為總樣中的峰1和2單體的混合物，組分IV為總樣中的峰4和5單體的混合物；

步驟（3）中循環逆流色譜模式分離純化的具體操作過程為：

a）切換六通閥至常規分離模式，將逆流色譜兩相溶劑體系進行流體動力學平衡，平衡好后，將步驟（2）中制備出的未分離的組分I或IV樣品進樣；

其中，所述兩相溶劑體系的配置為：將正庚烷/乙酸乙酯/甲醇/乙酸以體積比為5:4:1:1的比例配制成溶劑系統，置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層，分為上下兩相；

b）切換六通閥，進行樣品的循環逆流色譜，實現樣品的內循環分離；

c）待分離的樣品充分分離后，切換六通閥，進入常規洗脫模式，依據紫外檢測結果依次將分離得到的峰分管收集。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（2）中，所述步驟b）中總銀杏酸提取物為2.0 g。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（3）中，所述步驟a）中混合樣品進樣是步驟（2）中制備出的未分離的組分I或IV樣品溶解于5 mL上相和5 mL下相中。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（3）中，所述步驟a）中進樣過程為：將半制備型高速逆流色譜儀進樣閥處于進樣狀態，將固定相用泵以一定流速灌滿色譜分離柱，停泵；開啟速度控制器，使高速流色譜儀的色譜分離柱正轉，轉速達800轉/min時，設置流動相流速為2.0 mL/min，開始泵流動相，當達到流體動力學平衡后將溶解好的樣品用注射器注入逆流色譜儀進樣閥中，旋轉進樣閥為接柱狀態，使樣品進入色譜分離柱。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，高速逆流色譜儀柱體積為300 mL，上樣量500 mg，轉速800轉/min，上相為固定相，下相為流動相，流速2.0 mL/min，檢測波長254nm。

6.權利要求1-5任一所述的方法在銀杏酸類單體化合物分離制備中的應用。