[發明專利]一種銀杏酸類成分的制備方法

有效

• 申請號: 201810844527.0
• 申請日: 2018-07-27
• 公開（公告）號: CN109369382B
• 公開（公告）日: 2021-10-26
• 發明（設計）人: 王岱杰;耿巖玲;于金倩;李麗麗;陳龍;宋祥云
• 申請（專利權）人: 山東省分析測試中心
• 主分類號: C07C65/19
• 分類號: C07C65/19;C07C65/05;C07C51/42;C07C51/47;C07C51/48
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

本發明公開一種銀杏酸類成分的制備方法，其采用在線收集和循環高速逆流色譜模式進行分離純化，制得純度高于95％的銀杏酸類單體；最后將未完全分離的兩個銀杏酸單體進行制備液相色譜分離。高速逆流色譜分離所用到的條件是：溶劑系統為正庚烷：乙酸乙酯：甲醇：乙酸＝5:4:1:1，高速逆流色譜儀柱體積為300mL，上樣量500mg，轉速800轉/min，上相為固定相，下相為流動相，流速2.0mL/min，檢測波長254nm。本發明成本低于現有技術，操作簡便，效率高，可以較大批量從銀杏果皮中分離制備出純度大于95％的銀杏酸類單體化合物方法。

技術領域

本發明涉及中藥有效成分的高效制備方法，具體為一種銀杏酸類成分的制備方法。

背景技術

銀杏酸類化合物是銀杏中葉、白果和果皮中除了黃酮和內酯外的另一類重要的藥效成分，是 6-烯基水楊酸的衍生物。現代藥理研究表明，銀杏酸類成分具有抗病毒、抑菌、抗炎、抗癌、抗寄生蟲等多種藥理活性。由于銀杏酸成分是一種低極性結構類似物，分離難度高。目前，傳統的單體成分的分離方法包括硅膠柱色譜、制備液相色譜、大孔樹脂和 CO₂臨界萃取法等，楊長龍等，研究發現采用高效液相色譜法制備分離銀杏酸，分離到的銀杏酸中存在大量的脂肪酸；尹秀蓮，銀杏外種皮中銀杏酸的分離技術研究，大孔樹脂 S-8 分離銀杏酸的純度為 85.59%，然后又采用 CO₂臨界萃取法分離到的銀杏酸的純度為 77.66%，兩方法分離純度都不高；后來有學者對工藝不足進行改進，張敏敏，通過改進后的乙醇提取法對銀杏酸進行提取，然后用膜分離技術對其進行純化，獲得的銀杏酸的純度由 33.9% 提升至 77.8%。可見，以上方法費時費力、污染環境、樣品純度低，而且樣品通過反復柱層析對有不可逆性吸附作用，分離得到銀杏酸類化合物單體制備效率低、成本較高；所以，仍需繼續尋找新的簡單高效的方法制備高純度的銀杏酸。

高速逆流色譜（High-speed Counter-current Chromatography，HSCCC）是近 30年發展起來的一種連續的無需任何固體支持物的高效、快速的液-液分配色譜分離技術，它避免了固態支持體或載體帶來的樣品易被死吸附、損耗和變性等各種問題，使用其它液相色譜法進行制備型分離時，其分配效率會顯著降低，溶劑消耗量大，HSCCC 保證較高峰型分辨度，分離量大、樣品無損失、回收率高、分離環境緩和，節約溶劑。高速逆流色譜能直接進大量粗提樣品或合成混合物，分離結果能達到相當高的純度，已廣泛應用于生物、醫藥、環保等領域化學物質的制備分離和純化。目前尚無采用高速逆流色譜用于制備分離銀杏酸類單體化合物。

發明內容

本發明的目的就是為了解決上述技術背景中的不足，本發明公開一種制備成本低于現有技術，操作簡便，效率高，可以較大批量從銀杏果皮中分離制備出純度大于95%的銀杏酸類單體化合物方法。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案來實現：

一種銀杏酸類成分的制備方法，它包括以下步驟：

（1）將銀杏果外種皮與白果分離，外種皮置于陰涼處干燥，干燥后的外種皮采用石油醚提取三次，得到總銀杏酸提取物；

銀杏酸是低極性化合物，本發明利用低極性的石油醚，根據相似相容的原理，使外種皮提取效率最高，同時對于其它類型的有效成分，如黃酮和銀杏內酯類成分不會被提取出來。

（2）將總銀杏酸類成分采用在線收集和循環逆流色譜模式進行分離純化，制得純度高于 95%的銀杏酸類單體。

銀杏酸是一類低極性結構類似物，不同的化合物間僅在于脂肪鏈的長度和雙鍵位置的不同，長脂肪酸鏈結構決定了銀杏酸類化合物極性極小，可適用的逆流色譜溶劑體系較少，因此常規的逆流色譜分離方式很難將這些結構類似物一次分開，而本申請公開的循環逆流色譜模式體系可以完全分離純化杏酸。

（3）將未完全分離的銀杏酸單體進行制備液相色譜分離。

優選地，所述步驟（2）的操作步驟為：