[發(fā)明專利]一種銀杏酸類成分的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810844527.0
• 申請(qǐng)日: 2018-07-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109369382B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-10-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王岱杰;耿巖玲;于金倩;李麗麗;陳龍;宋祥云
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東省分析測(cè)試中心
• 主分類號(hào): C07C65/19
• 分類號(hào): C07C65/19;C07C65/05;C07C51/42;C07C51/47;C07C51/48
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

1.一種分離銀杏酸類成分的制備方法，其特征是：應(yīng)用高速逆流色譜分離，所述分離用到的條件是：溶劑系統(tǒng)為正庚烷：乙酸乙酯：甲醇：乙酸＝5:4:1:1，高速逆流色譜儀柱體積為300 mL，上樣量500 mg，轉(zhuǎn)速800轉(zhuǎn)/min，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，流速2.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm；

所述制備方法包括以下步驟：

（1）將銀杏果外種皮與白果分離，外種皮置于陰涼處干燥，干燥后的外種皮采用石油醚提取，得到總銀杏酸提取物；

（2）將總銀杏酸類成分采用在線收集和循環(huán)高速逆流色譜模式進(jìn)行分離純化，制得純度高于95%的銀杏酸類單體；

（3）將未完全分離的兩個(gè)銀杏酸單體進(jìn)行制備液相色譜分離;

步驟（2）中所述在線收集和循環(huán)高速逆流色譜的方法為：

(a):將所述的高速逆流色譜的兩相溶劑系統(tǒng)，置于分液漏斗中，搖勻后靜置分層，待平衡后將上下兩相分開(kāi)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相；

(b):取總銀杏酸提取物溶解于5 mL上相和5 mL下相的混合液中待用；

(c):首先使進(jìn)樣閥處于進(jìn)樣狀態(tài)，將固定相用泵以一定流速灌滿色譜分離柱，停泵；開(kāi)啟速度控制器，使高速流色譜儀的色譜分離柱正轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)速達(dá)800轉(zhuǎn)/min時(shí)，設(shè)置流動(dòng)相流速為2.0 mL/min，開(kāi)始泵流動(dòng)相，當(dāng)達(dá)到流體動(dòng)力學(xué)平衡后將溶解好的樣品用注射器注入逆流色譜儀進(jìn)樣閥中，旋轉(zhuǎn)進(jìn)樣閥為接柱狀態(tài)，使樣品進(jìn)入色譜分離柱，然后根據(jù)檢測(cè)器紫外光譜圖接收組分I和II；當(dāng)分離進(jìn)行到組分III的前沿，切換到六通閥2，將組分III收集到收集管；當(dāng)收集完畢后，切換六通閥1和2，組分IV經(jīng)過(guò)6次分離，成功分離得到峰7和峰8的單體化合物；切換至六通閥2，對(duì)組分III進(jìn)行循環(huán)逆流色譜分離，經(jīng)過(guò)10次分離得到峰4的單體化合物以及峰5和6的混合物；

峰4：白果新酸（GA 13:0）；

峰5：白果酸（GA 15:1）；

峰6：十七烷二烯銀杏酸（GA 17:2）；

峰7：氫化白果酸（GA 15:0）；

峰8：十七烷一烯銀杏酸（GA 17:1）。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離銀杏酸類成分的制備方法，其特征在于，步驟（1）中所述石油醚提取的沸程為60-90℃。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離銀杏酸類成分的制備方法，其特征在于，步驟（1）中所述石油醚提取3次，每次2 h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離銀杏酸類成分的制備方法，其特征在于，步驟（1）中總銀杏酸提取物為500mg。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離銀杏酸類成分的制備方法，其特征在于，將權(quán)利要求1所述的峰5和6的混合物經(jīng)過(guò)制備液相色譜二次分離，得到二者的高純度單體。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的分離銀杏酸類成分的制備方法，其特征在于，將權(quán)利要求1所述的峰5和6的混合物經(jīng)過(guò)制備液相色譜二次分離，分離條件：Waters Symmetry C18column，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，流速：1.0 mL/min，進(jìn)樣量：10 μL。