[發明專利]一種簀藻無菌苗的組織培養方法

有效

• 申請號: 201810834029.8
• 申請日: 2018-07-26
• 公開（公告）號: CN108901849B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 水生藻安生物科技（武漢）有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 馮子玲

本發明涉及一種簀藻無菌苗的組織培養方法，包括如下步驟：(1)配制初代培養基和增殖培養基，滅菌待用；(2)外植體的清洗與消毒；(3)將消毒后的外植體用滅菌紙片吸掉表面水分，轉接入初代培養基，然后向組培瓶中倒入30?60ml冷卻后的無菌水，使外植體沉沒于無菌水中，置于培養箱中誘導培養4周；(4)分離初代培養基中的外植體和產生的新芽，一起轉入增殖培養基中，倒入30?60ml冷卻后的無菌水，淹沒新的外植體和新芽，增殖培養4周；(5)將帶有完整根系的簀藻植株取出，清水沖洗后移栽到模擬的自然水體中生根培養。該方法可不受季節、溫度、地域影響獲得大量的新植株，新植株生根率達100％，成活率高，可快速建立簀藻無菌繁殖體系。

技術領域

本發明涉及植物組織培養技術領域，尤其涉及一種簀藻無菌苗的組織培養方法。

背景技術

簀藻又叫水篩，是一種較常用的觀賞水草。簀藻為沉水草本植物，與輪葉黑藻同屬水鱉科，單子葉植物。簀藻葉色美麗，是水族箱內沉水植物的重要布置材料，也是園林水景中的良好綠化材料。簀藻擁有細瘦的白色花瓣，適合種植在平坦的水族箱的前景區域，但由于簀藻屬于陽性草，對光、CO₂、水質以及水深有嚴格的要求，稍有不慎可能導致植物枯死、落葉等現象，因此其種植難度極高，需強烈光照度和極軟的軟水環境，不能在水質硬度太高及偏堿性的水中正常生長；光線不足時也會出現落葉現象。因此在水族領域簀藻繁殖不易，是栽培難度較高的水草種類之一，不易繁殖的屬性也讓很多愛好者望而卻步。

目前尚缺乏成熟的技術用于大規模繁殖優質的簀藻工程苗，同時使簀藻苗克服該物種對環境要求高、難繁殖的問題。

發明內容

為了克服現有技術的上述不足，本發明提出了一種簀藻無菌苗的組織培養方法，該方法是在無菌條件下，采取適宜培養環境、給予固定光照，誘導簀藻新的幼苗，逐步形成無菌苗體系，后期可常年提供大量無菌幼苗。該方法易行，操作方便，產量高，克服了水族缸中不易繁殖、植物種苗獲得困難的問題。

為了達到上述目的，本發明是通過以下技術方案實現的：

一種簀藻無菌苗的組織培養方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)配制初代培養基和增殖培養基，滅菌待用；

(2)外植體的清洗與消毒：以簀藻的健康、無病蟲害的植株作為外植體，洗凈后依次經酒精、0.1％升汞溶液消毒，再用無菌水洗凈待用；

(3)將消毒后的外植體用滅菌紙片吸掉表面水分，轉接入初代培養基，然后向組培瓶中倒入30-60ml冷卻后的無菌水，使外植體沉沒于無菌水中，置于培養箱中誘導培養4周；

(4)分離初代培養基中的外植體和產生的新芽，一起轉入增殖培養基中，倒入30-60ml冷卻后的無菌水，淹沒新的外植體和新芽，增殖培養4周；

(5)將帶有完整根系的簀藻植株取出，清水沖洗后移栽到模擬的自然水體中培養。

進一步地，所述步驟(1)中初代培養基為MS培養基、B5培養基、White培養基、N6培養基中的任一種。

更進一步地，所述初代培養基中添加初代培養激素為6氨基嘌呤和萘乙酸，所述6氨基嘌呤的添加濃度為0.5-1.5mg/L，所述萘乙酸的添加濃度為0.1-0.5mg/L。

進一步地，所述增殖培養基為MS培養基、B5培養基、White培養基、N6培養基中的任一種。

更進一步地，所述增殖培養基中添加增殖培養激素為激動素和萘乙酸，所述激動素的添加濃度為0.5-2mg/L，所述萘乙酸的添加濃度為0.1-0.5mg/L。

進一步地，外植體在清洗與消毒之前先對外植體進行葉片去除處理，留下芽心附近的8-12只葉片。