[發明專利]一種簀藻無菌苗的組織培養方法

有效

• 申請號: 201810834029.8
• 申請日: 2018-07-26
• 公開（公告）號: CN108901849B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 水生藻安生物科技（武漢）有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 馮子玲

1.一種簀藻無菌苗的組織培養方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)配制初代培養基和增殖培養基，滅菌待用；

(2)外植體的清洗與消毒：以簀藻的健康、無病蟲害的植株作為外植體，洗凈后依次經酒精、0.1％升汞溶液消毒，再用無菌水洗凈待用；

(3)將消毒后的外植體用滅菌紙片吸掉表面水分，轉接入初代培養基，然后向組培瓶中倒入30-60ml冷卻后的無菌水，使外植體沉沒于無菌水中，置于培養箱中誘導培養4周；

(4)分離初代培養基中的外植體和產生的新芽，一起轉入增殖培養基中，倒入30-60ml冷卻后的無菌水，淹沒新的外植體和新芽，增殖培養4周；

(5)將帶有完整根系的簀藻植株取出，清水沖洗后移栽到模擬的自然水體中培養。

2.根據權利要求1所述的一種簀藻無菌苗的組織培養方法，其特征在于，所述步驟(1)中初代培養基為MS培養基、B5培養基、White培養基、N6培養基中的任一種。

3.根據權利要求2所述的一種簀藻無菌苗的組織培養方法，其特征在于，所述初代培養基中添加初代培養激素為6BA 和萘乙酸，所述6BA 的添加濃度為0.5-1.5mg/L，所述萘乙酸的添加濃度為0.1-0.5mg/L。

4.根據權利要求1所述的一種簀藻無菌苗的組織培養方法，其特征在于，所述增殖培養基為MS培養基、B5培養基、White培養基、N6培養基中的任一種。

5.根據權利要求4所述的一種簀藻無菌苗的組織培養方法，其特征在于，所述增殖培養基中添加增殖培養激素為激動素和萘乙酸，所述激動素的添加濃度為0.5-2mg/L，所述萘乙酸的添加濃度為0.1-0.5mg/L。

6.根據權利要求1所述的一種簀藻無菌苗的組織培養方法，其特征在于，外植體在清洗與消毒之前先對外植體進行葉片去除處理，留下芽心附近的8-12只葉片。

7.根據權利要求1所述的一種簀藻無菌苗的組織培養方法，其特征在于，所述步驟(2)中外植體的清洗與消毒具體方法為：流水沖洗外植體20-40min，75％酒精消毒15-40s，沖洗3次；0.1％升汞溶液消毒5-20min，再用無菌水沖洗5次。

8.根據權利要求1所述的一種簀藻無菌苗的組織培養方法，其特征在于，步驟(3)中初代培養條件為：無菌環境，光照2500Lux，光照周期為12h/d，溫度23-27℃。

9.根據權利要求1所述的一種簀藻無菌苗的組織培養方法，其特征在于，步驟(4)中增殖培養條件為：無菌環境，光照2500Lux，光照周期為12h/d，溫度23-27℃。