[發明專利]一種高效液相色譜-質譜法測定棉花中褪黑素的方法

有效

• 申請號: 201810820637.3
• 申請日: 2018-07-24
• 公開（公告）號: CN108828098B
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 王群青;胥倩;路雅茹;陳懂懂;李彩霞
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240
• 代理人: 薛鵬喜

本發明公開了一種高效液相色譜?質譜法測定棉花中褪黑素的方法，包括：將棉花樣品加液氮研磨成粉末，然后與提取溶劑混合，經超聲提取后，以高效液相色譜?質譜法檢測，采用外標法對褪黑素進行定量。本發明首次實現了對棉花中褪黑素的提取和檢測，檢測方法的靈敏度高、專一性強、穩定性好、結果準確可靠。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，具體涉及一種高效液相色譜-質譜法測定棉花中褪黑素的方法。

背景技術

褪黑素(Melatonin，MT)是一種吲哚類激素，化學名稱為N-乙酰-5-甲氧基色胺，是一種廣譜的生理調節劑。褪黑素主要來自于哺乳動物的松果體，被證實是目前已知的抗氧化作用最強的內源性白由基清除劑。其對睡眠、促進性腺發育和生理節奏具有重要作用。

除動物外，目前在大多數食用植物，部分菊科植物，藥用植物以及一些植物種子中也發現了褪黑素的存在。其在植物中具有調節晝夜節律，光周期與生長發育的作用，此外對植物自身抵御冷害，光傷害，化學物質和重金屬離子傷害的能力皆有提高作用。最新研究表明，褪黑素除了在植物生長發育及自然逆境下發揮作用外，還可以提高植物抵御疾病的能力。褪黑素在動物中的功能包括清除自由基、增強免疫力、抑制衰老等作用，其生理與藥理功能的多樣性得到了國內外學者的普遍重視，美國食品與藥品管理局認可褪黑素作為普通膳食補充劑，中國衛生部則先后批準20余種含褪黑素產品作為改善睡眠的保健食品，全世界至今已經有數百萬人長期服用。通過對植物材料中MT含量的提取與檢測，可以評估相關食品的合理飲用量，為人們的健康飲食、功能保健食品的開發利用提供科學依據。

目前，測定褪黑素的方法主要有電化學分析法、免疫分析法、色譜法等，其中，電化學分析法和免疫分析法主要是針對人體血液或其他動物器官中的褪黑素檢測，專門針對植物中褪黑素檢測的參考方法較少；色譜法具有靈敏度高、準確度高等優點，在此基礎上又延伸出高效液相色譜與熒光檢測器聯用法(HPLC-FD)、高效液相色譜-質譜法(HPLC-MS)等檢測方法。這些方法應用的范圍依據植物的種類、檢測的精確度和特異性要求并不一致。HPLC-FD是植物中褪黑素定量研究的常用方法，但其對儀器設備要求較高，且熒光檢測結果易受到背景熒光、pH、檢測溫度、溶劑等條件的影響，對于與褪黑素結構相似的物質很難區分開；HPLC-MS可以同時提供目標激素的保留時間以及分子結構信息，具有靈敏度高，適合多組分分析，可靠穩定等優點，可以實現定性和定量分析的同時完成。

發明內容

針對上述現有技術，本發明的目的是提供一種高效液相色譜-質譜法測定棉花中褪黑素的方法。該方法靈敏度高、專一性強、穩定性好，可以實現對棉花中的褪黑素進行快速、準確檢測。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種高效液相色譜-質譜法測定棉花中褪黑素的方法，包括：將棉花樣品加液氮研磨成粉末，然后與提取溶劑混合，經超聲提取后，以高效液相色譜-質譜法檢測，采用外標法對褪黑素進行定量。

優選的，所述提取溶劑為甲醇。

優選的，棉花樣品與提取溶劑加入量的比為1g:10ml。提取溶劑的加入量會直接影響目標成分的提取效果。若提取溶劑的加入量過少，混合物濃度大，萃取時易發生乳化現象，且液體粘度大，空化較難發生；若提取溶劑的加入量過大，則不利于提取后溶劑的回收，造成提取溶劑的浪費，不利于節能環保。本發明對提取溶劑的用量進行了優化考察，結果發現，棉花樣品與提取溶劑加入量的比為1g:10ml時，能夠取得最優的提取效果。