[發(fā)明專利]一種高效液相色譜-質(zhì)譜法測定棉花中褪黑素的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810820637.3
• 申請日: 2018-07-24
• 公開（公告）號: CN108828098B
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發(fā)明（設計）人: 王群青;胥倩;路雅茹;陳懂懂;李彩霞
• 申請（專利權）人: 山東農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業(yè)) 37240
• 代理人: 薛鵬喜

1.一種高效液相色譜-質(zhì)譜法測定棉花中褪黑素的方法，其特征在于，包括：將棉花樣品加液氮研磨成粉末，然后與提取溶劑混合，經(jīng)超聲提取后，以高效液相色譜-質(zhì)譜法檢測，采用外標法對褪黑素進行定量；

超聲提取的條件為超聲功率200-300W，超聲時間30min；

高效液相色譜-質(zhì)譜法檢測的色譜條件為：采用C18柱；流動相由A相和B相組成，A相為0.1％甲酸水溶液，B相為甲醇；采用梯度洗脫；所述梯度洗脫的程序為：0-0.2min，A相＝90％；0.2-3min，A相遞減至0％；3-6min，A相＝0％；6-8.1min，A相遞增至90％；6.1-10min，A相＝90％；

高效液相色譜-質(zhì)譜法檢測的質(zhì)譜條件為：噴霧電壓：3500V，鞘氣：35Arb，輔助氣：10Arb，霧化溫度：275℃，離子傳輸管溫度：325℃，檢測離子：母離子為m/z233.152，子離子為m/z174.000、159.000和130.071。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取溶劑為甲醇。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的方法，其特征在于，棉花樣品與提取溶劑加入量的比為1g:10ml。

4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述超聲提取與高效液相色譜-質(zhì)譜法檢測之間還包括：以8000r/min離心10min，取上清液并用氮氣吹干，將吹干的殘余物質(zhì)溶于5％甲醇水溶液制成備用溶液的步驟，以及采用甲醇和水激活C18柱，將備用溶液加進C18柱中，待完全流出后用5％甲醇水溶液沖洗C18柱，再用80％甲醇水溶液將吸附在C18柱中的褪黑素洗脫出來并過濾的步驟。

5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，外標法對褪黑素進行定量的標準曲線為：Y＝1.94458×10⁷+5.0306×10⁷X；其中，Y代表峰面積，X代表褪黑素濃度。