[發明專利]一種遺傳性耳聾基因的檢測方法及檢測試劑盒在審
| 申請號： | 201810818663.2 | 申請日： | 2018-07-24 |
| 公開（公告）號： | CN108977517A | 公開（公告）日： | 2018-12-11 |
| 發明（設計）人： | 王文忠;張為;田軍龍;胡軍;陳蘇平 | 申請（專利權）人： | 為康（蘇州）基因科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6858 | 分類號： | C12Q1/6858;C12Q1/6883 |
| 代理公司： | 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 韓飛 |
| 地址： | 215000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 遺傳性耳聾 基因片段 檢測試劑 基因 單堿基延伸引物 多重PCR擴增 目標DNA序列 單堿基延伸 特異性引物 基因篩查 健康管理 目標片段 遺傳狀況 有效預防 質譜分析 樣本DNA 有效地 檢測 單管 耳聾 核酸 擴增 延緩 測量 幫助 | ||
1.一種遺傳性耳聾基因的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
提取樣本DNA；
設計用于擴增遺傳性耳聾基因片段的特異性引物；
利用單管多重PCR擴增反應得到目標片段；
設計用于遺傳性耳聾基因片段的單堿基延伸引物；
遺傳性耳聾基因片段單堿基延伸；
核酸質譜分析測量所述目標DNA序列。
2.根據權利要求1所述的遺傳性耳聾基因的檢測方法，其特征在于：所述遺傳性耳聾基因片段包括GJB2片段、SLC26A4片段、線粒體12s rRNA片段。
3.根據權利要求2所述的遺傳性耳聾基因的檢測方法，其特征在于：所述用于擴增遺傳性耳聾基因片段的特異性引物包括：
用于擴增所述GJB2片段的特異性引物，正向引物為：SEQ ID Nos：1，反向引物為SEQ IDNos：2；
用于擴增所述SLC26A4片段的特異性引物，正向引物為：SEQ ID Nos：3，反向引物為SEQID Nos：4；
用于擴增所述線粒體12s rRNA片段的特異性引物，正向引物為：SEQ ID Nos：3，反向引物為SEQ ID Nos：4。
4.根據權利要求2所述的遺傳性耳聾基因的檢測方法，其特征在于：所述用于遺傳性耳聾基因片段的單堿基延伸引物包括：
用于所述GJB2片段的單堿基延伸引物，序列為SEQ ID Nos：61；
用于所述SLC26A4片段的單堿基延伸引物，序列為SEQ ID Nos：62；
用于所述線粒體12s rRNA片段的單堿基延伸引物，序列為SEQ ID Nos：62。
5.根據權利要求1所述的遺傳性耳聾基因的檢測方法，其特征在于：所述利用單管多重PCR擴增反應包括以下步驟：Taq酶激活，DNA變性。
6.根據權利要求5所述的遺傳性耳聾基因的檢測方法，其特征在于：所述Taq酶激活時溫度為95℃。
7.根據權利要求5所述的遺傳性耳聾基因的檢測方法，其特征在于：所述Taq酶激活時間為15分鐘。
8.根據權利要求5所述的遺傳性耳聾基因的檢測方法，其特征在于：所述DNA變性時溫度為95℃。
9.根據權利要求5所述的遺傳性耳聾基因的檢測方法，其特征在于：DNA變性時間為15秒。
10.一種遺傳性耳聾基因的檢測試劑盒，其特征在于，包括：
用于擴增遺傳性耳聾基因片段的特異性引物，所述特異性引物包括SEQ ID Nos：1、SEQID Nos：2、SEQ ID Nos：3、SEQ ID Nos：4；
用于遺傳性耳聾基因片段的單堿基延伸引物，所述單堿基延伸引物包括SEQ ID Nos：61、SEQ ID Nos：62。
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