[發明專利]降血糖的低極性羅漢果皂苷群及其制備方法

在審

• 申請號: 201810809907.0
• 申請日: 2018-07-23
• 公開（公告）號: CN109134579A
• 公開（公告）日: 2019-01-04
• 發明（設計）人: 李曉波;王夢月;張玉龍;彭穎
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C07J17/00
• 分類號: C07J17/00;A61K31/704;A61P3/10
• 代理公司: 上海交達專利事務所 31201
• 代理人: 王毓理;王錫麟

一種降血糖的低極性羅漢果皂苷群及其制備方法，首先以羅漢果酸水解得到皂苷粗提物，然后采用大孔樹脂和聚酰胺柱色譜進一步純化得到低極性羅漢果皂苷群。本發明針對羅漢果降糖的有效部位—羅漢果低極性皂苷群，采用酸水解方法定向制備低極性羅漢果皂苷，得到的有效部位有明顯降低II型糖尿病血糖的效果。

技術領域

本發明涉及的是一種醫療藥物制備領域的技術，具體是一種降血糖的低極性羅漢果皂苷群及其制備方法。

背景技術

羅漢果為葫蘆科植物羅漢果[Siraitia grosvenorii(Swingle)C.Jeffery ex Luet Z.Y.Zhang]的干燥成熟果實，其皂苷提取物具有顯著降低糖尿病模型大鼠、小鼠血糖的作用。鮮羅漢果皂苷提取物對正常小鼠餐后血糖生成有明顯的抑制作用。

但最新研究表明，羅漢果三萜皂苷經糖尿病人源腸道菌代謝發生脫糖反應，代謝成賽門苷Ⅰ、羅漢果苷ⅣE、羅漢果苷Ⅱ、羅漢果苷ⅠA₁和羅漢果苷ⅠE₁等產物，以低于4個糖基的低極性三萜皂苷類成分為主。羅漢果苷V在糖尿病大鼠體內亦代謝產生1-3個糖基的低極性三萜皂苷類成分。因此，對1-3個糖基的低極性三萜皂苷類成分進行制備及活性研究具有重要意義。然而，含1～3個糖基的皂苷在羅漢果藥材中含量極低，僅約為羅漢果苷V含量的8％，難以規模制備。

發明內容

本發明針對現有技術存在的上述不足，提出一種降血糖的低極性羅漢果皂苷群及其制備方法，針對羅漢果降糖的有效部位—羅漢果低極性皂苷群，采用酸水解方法定向制備低極性羅漢果皂苷，得到的有效部位有明顯降低II型糖尿病血糖的效果。

本發明是通過以下技術方案實現的：

本發明涉及一種低極性羅漢果皂苷群的工業制備方法，首先以羅漢果酸水解得到皂苷粗提物，然后采用大孔樹脂和聚酰胺綜合吸附進一步純化得到低極性羅漢果皂苷群。

所述的酸水解，以干燥成熟羅漢果為原料，經濃縮得到干浸膏后通過硫酸和/或鹽酸水解制備皂苷粗提物。

所述的干浸膏，通過選取羅漢果經破碎后加入乙醇，經加熱回流后過濾濃縮得到。

所述的通過硫酸和/或鹽酸水解是指：將干浸膏稀釋后加入硫酸和/或鹽酸并加熱孵育，然后將水解上清通過有機試劑萃取后濃縮得到。

所述的有機試劑包括乙酸乙酯和正丁醇。

所述的綜合吸附是指：取AB-8大孔吸附樹脂和聚酰胺用乙醇浸泡后，裝柱，用蒸餾水洗至無醇味，再經酸堿沖洗后用蒸餾水沖洗至中性；然后經水溶解后取上清溶液，上樣于預處理好的大孔樹脂柱吸附后，分別用水和乙醇除去水溶性雜質后，再用乙醇進行5～27個柱體積洗脫，得到含低極性羅漢果皂苷群的乙醇洗脫液，濃縮、低溫減壓干燥，得干燥粉末；最后將干燥粉末以干法上樣于預處理好的聚酰胺柱，用水除去水溶性雜質，再用乙醇進行5個柱體積洗脫，得到含羅漢果低極性皂苷群的乙醇洗脫液，將其濃縮，低溫減壓干燥，得低極性羅漢果皂苷群。

所述的低極性羅漢果皂苷群，采用UPLC測定低極性羅漢果皂苷群的含量，計算總含量。UPLC檢測條件為：采用C18色譜柱，以水(A)-乙腈(B)梯度洗脫，梯度洗脫程序為：0～30min 20％～50％B，30～32min 50％～20％B，20％B 32～33min，檢測波長為205nm，流速為0.6mL/min。

本發明涉及上述方法制備得到的低極性羅漢果皂苷群，包含羅漢果苷Ⅲ、羅漢果苷ⅢA₁、羅漢果苷ⅡE、羅漢果苷ⅡA₁和羅漢果苷ⅠA₁的混合物，其中：羅漢果苷Ⅲ、羅漢果苷ⅢA₁、羅漢果苷ⅡE、羅漢果苷ⅡA₁和羅漢果苷ⅠA₁的含量分別為0.5％～5％、0.5％～5％、1％～20％、1％～20％、2％～40％，總含量大于60％。