[發(fā)明專利]一種構(gòu)建結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)型核酸適配體的通用方法及應(yīng)用其的通用型傳感器和其構(gòu)建方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201810807459.0 | 申請(qǐng)日： | 2018-07-21 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN110734957B | 公開(kāi)（公告）日： | 2023-01-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 婁新徽;黃旸 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 首都師范大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/6806 | 分類號(hào)： | C12Q1/6806;G01N33/531;G01N33/53 |
| 代理公司： | 北京展翅星辰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11693 | 代理人： | 王文生 |
| 地址： | 100048 北*** | 國(guó)省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 構(gòu)建 結(jié)構(gòu) 開(kāi)關(guān) 核酸 適配體 通用 方法 應(yīng)用 通用型 傳感器 | ||
1.一種構(gòu)建結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)型核酸適配體的通用方法，其特征在于，包括如下步驟：設(shè)計(jì)具有結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)性能的核酸適配體：將核酸適配體的兩端分別連接富含鳥(niǎo)嘌呤核苷酸G的序列來(lái)構(gòu)建具有結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)性能的探針Apt-G4，所述具有結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)性能的探針Apt-G4為A-SULF-A；A-TBA29-A;和A-T11-A;
其中，探針A-SULF-A的序列為：
AGGGACGGGACTAGAGAGGGCAACGAGTGTTTATAGAAGGGACGGGA
探針A-TBA29-A的序列為：
AGGGACGGGAAGTCCGTGGTAGGGCAGGTTGGGGTGACTAGGGACGGGA
探針A-T11-A的序列為：
AGGGACGGGATTTTTTTTTTTAGGGACGGGA。
2.一種通用型傳感器的構(gòu)建方法，包括：步驟(1) 設(shè)計(jì)具有結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)性能的核酸適配體：將核酸適配體的兩端分別連接富含鳥(niǎo)嘌呤核苷酸G的序列來(lái)構(gòu)建具有結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)性能的探針Apt-G4，所述具有結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)性能的探針Apt-G4為A-SULF-A；A-TBA29-A;和A-T11-A；以及步驟(2) 95℃加熱Apt-G4，緩冷至室溫；
其中，探針A-SULF-A的序列為：
AGGGACGGGACTAGAGAGGGCAACGAGTGTTTATAGAAGGGACGGGA
探針A-TBA29-A的序列為：
AGGGACGGGAAGTCCGTGGTAGGGCAGGTTGGGGTGACTAGGGACGGGA
探針A-T11-A的序列為：
AGGGACGGGATTTTTTTTTTTAGGGACGGGA。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的通用型傳感器的構(gòu)建方法，其特征在于，還包括步驟（3） 加入不同濃度的待測(cè)物質(zhì)與Apt-G4孵育形成混合液；步驟（4） 加入氯化血紅素與上述混合液孵育;步驟（5） 同時(shí)加入過(guò)氧化氫與2'-聯(lián)氨-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸，測(cè)定選定時(shí)間的418nm處的紫外吸收，以紫外吸收值為縱坐標(biāo)，待測(cè)物質(zhì)的濃度為橫坐標(biāo)繪制工作曲線。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的通用型傳感器的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟(2)中，95℃恒溫加熱6分鐘，然后緩冷至25℃。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的通用型傳感器的構(gòu)建方法，其特征在于，還包括步驟(6) 選擇性試驗(yàn)：將待測(cè)物質(zhì)分別替換為等濃度的其它物質(zhì)，重復(fù)步驟（1）-（5）實(shí)驗(yàn)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的通用型傳感器的構(gòu)建方法，其特征在于，所述具有結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)性能的探針Apt-G4配置成濃度為0.375μM的溶液。
7.一種構(gòu)建結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)型核酸適配體的通用型傳感器，其特征在于，該傳感器包括具有結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)性能的核酸適配體，該核酸適配體的兩端分別連接富含鳥(niǎo)嘌呤核苷酸G的序列來(lái)構(gòu)建具有結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)性能的探針Apt-G4，所述具有結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)性能的探針Apt-G4為A-SULF-A；A-TBA29-A;和A-T11-A；
其中，探針A-SULF-A的序列為：
AGGGACGGGACTAGAGAGGGCAACGAGTGTTTATAGAAGGGACGGGA
探針A-TBA29-A的序列為：
AGGGACGGGAAGTCCGTGGTAGGGCAGGTTGGGGTGACTAGGGACGGGA
探針A-T11-A的序列為：
AGGGACGGGATTTTTTTTTTTAGGGACGGGA。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的傳感器，其特征在于，所述具有結(jié)構(gòu)開(kāi)關(guān)性能的探針Apt-G4配置成濃度為0.375μM的溶液。
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- 開(kāi)關(guān)（智慧開(kāi)關(guān)）
- 開(kāi)關(guān)（智慧開(kāi)關(guān)）
- 開(kāi)關(guān)（表情開(kāi)關(guān)）
- 感應(yīng)開(kāi)關(guān)（雙開(kāi)關(guān)）
- 電器開(kāi)關(guān)（雙開(kāi)關(guān)）
- 開(kāi)關(guān)（雙位開(kāi)關(guān)）
