[發明專利]一種利用液質聯用技術檢測蛋白粉的磷脂的方法

有效

• 申請號: 201810804176.0
• 申請日: 2018-07-20
• 公開（公告）號: CN108896680B
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發明（設計）人: 葉少文;蘇昭侖;李珍
• 申請（專利權）人: 湯臣倍健股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/04;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 張春水;唐京橋

1.一種利用液質聯用技術檢測蛋白粉的磷脂的方法，其特征在于，包括：

步驟1、單獨配制磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸和磷脂酰肌醇的梯度濃度的工作標準液，采用HPLC-MS/MS聯用技術檢測，以濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標，繪制標準工作曲線；

其中，HPLC系統條件為：

以C4色譜柱為固定相，以甲醇和乙腈為流動相A的有機相、以含乙酸銨的水溶液為流動相A的水相，以含乙酸銨的異丙醇為流動相B進行梯度洗脫；其中，所述流動相A相中，所述甲醇：所述乙腈：所述含乙酸銨的水溶液的體積比為1：1：3；其中含乙酸銨的濃度為5mmol/L；

所述流動相B相中，所述異丙醇中含5mmol/L的乙酸銨；所述梯度洗脫的程序為0.5 min20% B，1.5 min 40% B，3.0 min 60% B，13.0 min 98% B，13.1 min 20% B，17.0 min 20%B；

步驟2、取待測樣品用溶劑超聲波提取，離心，過濾獲得供試品溶液，按照步驟1中HPLC-MS/MS聯用技術檢測，得到的檢測結果代入到所述標準工作曲線中獲得待測樣品中磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸或磷脂酰肌醇的濃度，其中，待測樣品包括磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸和磷脂酰肌醇；采用HPLC-MS/MS聯用技術檢測采用ESI中性丟失模式分析；

當檢測所述待測樣品的磷脂酰乙醇胺時，ESI中性丟失模式的掃描范圍為600-800；當檢測所述待測樣品的磷脂酰絲氨酸時，ESI中性丟失模式的掃描范圍為600-950；當檢測所述待測樣品的磷脂酰肌醇時，ESI中性丟失模式的掃描范圍為840-940。

2.根據權利要求1所述的利用液質聯用技術檢測蛋白粉的磷脂的方法，其特征在于，所述C4色譜柱的柱溫為30-50℃。

3.根據權利要求1所述的利用液質聯用技術檢測蛋白粉的磷脂的方法，其特征在于，所述HPLC的流速為0.3-0.6mL/min。

4.根據權利要求1所述的利用液質聯用技術檢測蛋白粉的磷脂的方法，其特征在于，所述溶劑包括三氯甲烷和甲醇；所述三氯甲烷：所述甲醇的體積比為1:1。