[發(fā)明專利]一種高分辨生物檢測成像方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810801905.7
• 申請日: 2018-07-19
• 公開（公告）號: CN109030454A
• 公開（公告）日: 2018-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王毅;胡永奇;張慶文
• 申請（專利權(quán)）人: 溫州森佰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;G01N21/552
• 代理公司: 浙江納祺律師事務(wù)所 33257
• 代理人: 朱德寶

1.一種高分辨生物檢測成像方法，其特征在于：包括下述步驟：

步驟一：將激光聚焦到第一顯微鏡物鏡的后焦面；

步驟二：將第一顯微鏡物鏡出射的平行光經(jīng)過匹配油層；

步驟三：將經(jīng)過匹配油層的光線耦合進(jìn)入到表面等離子體共振芯片，表面等離子體共振芯片背向光線的一側(cè)放置有待測樣品；

步驟四：將激光經(jīng)過表面等離子體共振芯片耦合到待測樣品一側(cè)，待測樣品在激光的作用下產(chǎn)生拉曼散射信號；表面等離子體共振芯片反射光線；

步驟五：將拉曼散射信號經(jīng)過第二顯微鏡物鏡，被拉曼光譜儀接收；表面等離子體共振芯片反射光線，通過第一顯微物鏡出射，被反射圖像傳感器接收；

步驟六：將拉曼光譜儀和反射圖像傳感器的成像共同使用進(jìn)行定量和定性分析。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高分辨生物檢測成像方法，其特征在于：

步驟一中，激光經(jīng)過入射角調(diào)整組件和分束器后聚焦于顯微鏡物鏡的后聚焦面上，所述入射角調(diào)整組件包括偏振片、設(shè)置于偏振片光路前端的準(zhǔn)直透鏡、設(shè)置于偏振片光路后端的聚光透鏡。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種高分辨生物檢測成像方法，其特征在于：

所述的入射角調(diào)整組件整體置于移動平臺上。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高分辨生物檢測成像方法，其特征在于：所述步驟二中所述的匹配油的折射率范圍為1.515～1.780。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高分辨生物檢測成像方法，其特征在于：

步驟五所述的反射圖像傳感器為CCD圖像傳感器或CMOS圖像傳感器。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種高分辨生物檢測成像方法，其特征在于：所述的偏振片天然的雙折射晶體或人造的偏振片。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高分辨生物檢測成像方法，其特征在于：所述第一顯微鏡物鏡和第二顯微鏡物鏡的放大倍數(shù)在40～100倍之間，第一顯微物鏡其數(shù)值孔徑范圍為1.40～1.69，第二顯微物鏡數(shù)值空間范圍為0.5～1.69.。

8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種高分辨生物檢測成像方法，其特征在于：所述分束器是棱鏡、分色鏡、薄膜分束器或半片全反射鏡中的一種。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高分辨生物檢測成像方法，其特征在于：表面等離子體共振芯片由基底材料和金屬層構(gòu)成，其中基底材料為鑭玻璃、BK7玻璃、普通玻璃、塑料基片中的一種，在該基底材料上先蒸鍍一層2nm±1的金屬鉻，再蒸鍍一層厚度為40～60nm的金、銀、銅、鋁、鉑的一種或多種材料的復(fù)合層，所述復(fù)合層為單一薄膜結(jié)構(gòu)或納米陣列結(jié)構(gòu)。

10.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種高分辨生物檢測成像方法，其特征在于：所述分束器向反射圖像傳感器之間的反射光路上還設(shè)置有透鏡。