[發(fā)明專利]一種大豆及其制品核酸的快速提取方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810799201.0 | 申請日： | 2018-07-19 |
| 公開（公告）號： | CN110734906A | 公開（公告）日： | 2020-01-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 伍輝;吳堅 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 33100 浙江杭州金通專利事務(wù)所有限公司 | 代理人： | 劉曉春 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 大豆 核酸 豆制品 常溫狀態(tài) 核酸分離 核酸擴增 固溶物 裂解液 乙二胺四乙酸二鈉 核酸提取物 反應(yīng)條件 核酸提取 快速檢測 快速提取 三氯甲烷 裂解 研究 | ||
1.一種大豆及其制品核酸的快速提取方法，其特征在于，所述大豆及其制品核酸的快速提取方法包括如下步驟：
首先，將大豆或其制品研磨成粉狀樣品，在常溫下與裂解液進行混勻，靜置一段時間；然后，加入三氯甲烷進行混勻；最后，離心吸取上清，即獲得核酸提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大豆及其制品核酸的快速提取方法，其特征在于，所述裂解液為氫氧化鈉與高濃度乙二胺四乙酸二鈉的混合液體。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的大豆及其制品核酸的快速提取方法，其特征在于，優(yōu)選地，氫氧化鈉的濃度為0.05 M ~ 1 M，乙二胺四乙酸二鈉的濃度為100 mM ~ 150mM；更優(yōu)選地，氫氧化鈉的濃度為0.2 M ~ 0.8 M，乙二胺四乙酸二鈉的濃度為110 mM ~ 140 mM；最優(yōu)選地，氫氧化鈉的濃度為0.4 M ~ 0.6 M，乙二胺四乙酸二鈉的濃度為120 mM ~ 130 mM。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的大豆及其制品核酸的快速提取方法，其特征在于，優(yōu)選地，樣品與裂解液的質(zhì)量體積比為4:9~ 4:18；更優(yōu)選地，樣品與裂解液的質(zhì)量體積比為4:9~ 4:14；最優(yōu)選地，樣品與裂解液的質(zhì)量體積比為4:10 ~ 4:12。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的大豆及其制品核酸的快速提取方法，其特征在于，優(yōu)選地，樣品與裂解液混勻后，靜置時間為1 ~ 5 min；更優(yōu)選地，靜置時間為2 ~ 4 min；最優(yōu)選地，靜置時間為2 ~ 3 min。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的大豆及其制品核酸的快速提取方法，其特征在于，優(yōu)選地，三氯甲烷與裂解液的體積比為2:7 ~ 7:7；更優(yōu)選地，三氯甲烷與裂解液的體積比為3:7 ~ 6:7；最優(yōu)選地，三氯甲烷與裂解液的體積比為4:7 ~ 6:7。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的大豆及其制品核酸的快速提取方法，其特征在于，優(yōu)選地，離心轉(zhuǎn)速為8000 rpm ~ 15000 rpm，時間為2 ~ 8 min；更優(yōu)選地，離心轉(zhuǎn)速為9000 rpm ~14000 rpm，時間為4 ~ 7 min；最優(yōu)選地，離心轉(zhuǎn)速為11000 rpm ~ 13000 rpm，時間為4 ~6 min。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的大豆及其制品核酸的快速提取方法，其特征在于，核酸提取物需要用TE緩沖液進行稀釋：優(yōu)選地，用TE緩沖液將核酸提取物進行10至100倍稀釋；更優(yōu)選地，用TE緩沖液將核酸提取物進行20至80倍稀釋；最優(yōu)選地，用TE緩沖液將核酸提取物進行40至70倍稀釋，所述TE緩沖溶液為由10 mM Tris和1 mM EDTA混合而成的且pH為8.0的溶液。
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