[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于熒光PCR擴(kuò)增試劑的凍干方法及其應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201810792650.2 | 申請(qǐng)日: | 2018-07-18 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN108913758B | 公開(kāi)(公告)日: | 2022-06-14 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 童超;陳智林;魏莎莎;高幼冷 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: | 貝南生物科技(廈門(mén))有限公司 |
| 主分類(lèi)號(hào): | C12Q1/686 | 分類(lèi)號(hào): | C12Q1/686 |
| 代理公司: | 福州元?jiǎng)?chuàng)專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡學(xué)俊 |
| 地址: | 361026 福建省廈門(mén)市*** | 國(guó)省代碼: | 福建;35 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 用于 熒光 pcr 擴(kuò)增 試劑 方法 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種用于熒光PCR擴(kuò)增試劑的凍干方法,其特征在于:將熒光PCR擴(kuò)增液體試劑經(jīng)過(guò)預(yù)凍,在真空狀態(tài)下進(jìn)行升華,從而制備成凍干粉;所述凍干方法包括以下步驟:
(1)將熒光PCR擴(kuò)增液體試劑放入凍干機(jī)中,-35℃預(yù)凍3小時(shí);
(2)將凍干機(jī)氣壓降到10Pa以下-35℃真空處理2小時(shí);
(3)真空狀態(tài)下將凍干機(jī)內(nèi)部溫度升至10℃真空處理2小時(shí);
(4)真空狀態(tài)下將凍干機(jī)內(nèi)部溫度升至30℃真空處理2小時(shí);
所述熒光PCR擴(kuò)增試劑包含熒光PCR擴(kuò)增緩沖液、引物、探針、熱啟動(dòng)Taq酶、UNG酶、dATP、dGTP、dCTP、dTTP、dUTP、凍干保護(hù)劑;
所述的凍干保護(hù)劑,包含:5wt.%的甘油、100mg/mL的海藻糖、5mmol/L的DTT、1wt.%牛血清白蛋白、0.3wt.%Proclin 300、1wt.%甲酰胺。
2.如權(quán)利要求1所述的一種用于熒光PCR擴(kuò)增試劑的凍干方法在實(shí)時(shí)熒光PCR反應(yīng)中的應(yīng)用,其特征在于:使用時(shí)只需用凍干粉溶解液溶解該凍干粉,然后加入樣本;所述凍干粉溶解液,包含:0.5%TritonX-100、10mmol/L的Tris-HCl、
20mmol/L NaCl、3%蔗糖。
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