[發(fā)明專利]用于檢測刀豆蛋白A的傳感器及其制備方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810783531.0
• 申請日: 2018-07-17
• 公開（公告）號: CN109100400B
• 公開（公告）日: 2019-11-08
• 發(fā)明（設計）人: 陳時洪;張涵;譚興容
• 申請（專利權）人: 西南大學
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N27/30;G01N27/327;G01N27/38
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 史晶晶

本發(fā)明涉及電致化學發(fā)光傳感器技術領域，尤其是涉及一種用于檢測刀豆蛋白A的傳感器及其制備方法和應用。所述用于檢測刀豆蛋白A的傳感器，包括陰極發(fā)光體、陽極發(fā)光體和共反應試劑，所述陰極發(fā)光體包括氧化石墨烯修飾的碲化鎘量子點，所述陽極發(fā)光體包括納米金和納米鉑修飾的N?(氨基丁基)?N?(乙基異魯米諾)。所述制備方法包括：氧化石墨烯修飾的碲化鎘量子點與識別單元通過π?π堆積結合，并修飾于預處理的電極表面；再修飾結合有識別單元的陽極發(fā)光體，孵育得到所述傳感器。本發(fā)明基于競爭消耗氧氣構建比率型的電致化學發(fā)光體系，提高了信噪比，使檢測結果的可靠性高。

技術領域

本發(fā)明涉及電致化學發(fā)光傳感器技術領域，尤其是涉及一種用于檢測刀豆蛋白A的傳感器及其制備方法和應用。

背景技術

電致化學發(fā)光(Electrogenerated Chemiluminescence，ECL)是電化學和光譜學方法結合的一種新型檢測技術，具有通用性強，光學裝置簡單，良好的時間和空間控制性等優(yōu)點，因此在金屬離子的檢測、分子的識別、DNA的檢測以及免疫分析等方面得到了廣泛應用。

目前，ECL檢測大部分都是基于單信號檢測。這些單信號檢測方法易受電極表面變化以及非目標物誘導試劑解離等影響而引起結果失真，尤其是在細胞以及體液等復雜的生物環(huán)境中。因此，克服環(huán)境因素干擾，提高分析靈敏度和可靠性，對臨床的微量和痕量分析至關重要。

刀豆蛋白A(Concanavalin A，Con A)是一種糖類結合蛋白質，是一種植物血凝素，具有強力的促有絲分裂作用，有較好的促淋巴細胞轉化反應的作用，能沉淀肝糖原，凝集羊、馬、狗、兔、豬、大鼠、小鼠、豚鼠等動物及人紅細胞，還能選擇性激活抑制性T細胞(Ts)細胞，對調節(jié)機體免疫反應具有重要作用。作為一種介導病理和生理反應的凝集素模型，ConA通常被選作用于進一步的臨床檢測。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內容

本發(fā)明的第一目的在于提供一種用于檢測刀豆蛋白A的傳感器，所述傳感器是基于競爭消耗氧氣構建的比率型的電致化學發(fā)光體系，提高了信噪比，相對于單一信號檢測手段，有效避免由儀器、環(huán)境因素、以及一些人為操作因素導致的對檢測的干擾，使檢測結果的可靠性高。

本發(fā)明的第二目的在于提供一種所述用于檢測刀豆蛋白A的傳感器的制備方法，所述制備方法的工藝簡單，反應條件溫和，可操作性強。

本發(fā)明的第三目的在于提供一種所述用于檢測刀豆蛋白A的傳感器在檢測刀豆蛋白A中的應用，所述傳感器對刀豆蛋白A的檢測靈敏度高，檢測限低，能夠對樣品中的刀豆蛋白A進行超微量檢測，可信度高。

為了實現本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術方案：

一種用于檢測刀豆蛋白A的傳感器，包括陰極發(fā)光體、陽極發(fā)光體和共反應試劑，所述陰極發(fā)光體包括氧化石墨烯修飾的碲化鎘量子點，所述陽極發(fā)光體包括納米金和納米鉑修飾的N-(氨基丁基)-N-(乙基異魯米諾)。

本發(fā)明分別采用氧化石墨烯修飾的碲化鎘量子點作為陰極發(fā)光體，納米金鉑修飾的N-(氨基丁基)-N-(乙基異魯米諾)作為陽極發(fā)光體，陰極發(fā)光體上修飾能夠識別目標物刀豆蛋白A的識別單元，用于結合目標物，石墨烯修飾的碲化鎘量子點作為基質，與識別單元通過π-π堆積作用進行結合，從而可通過碳水化合物與蛋白質之間的生物特異性作用固載目標待測物Con A；陽極發(fā)光體上同樣修飾能夠識別目標物刀豆蛋白A的識別單元，進一步借助陰極發(fā)光體復合物上固載的目標待測物Con A與陽極發(fā)光體中的識別單元的特異性識別而實現陽極發(fā)光體的固載。隨著目標待測物Con A濃度的增加，陽極發(fā)光體的固載量隨之增加，由于陰極發(fā)光體和陽極發(fā)光體競爭共反應試劑而導致陰極發(fā)光體的ECL信號減小，陽極發(fā)光體的ECL信號增強，從而得到兩ECL信號的相反變化，通過信號比率檢測目標待測物Con A的濃度。