[發(fā)明專利]兩種異喹啉類化合物及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810781614.6
• 申請日: 2018-07-17
• 公開（公告）號: CN108997334A
• 公開（公告）日: 2018-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃勝雄;向文勝;楊靜;紀旭;李潔;郭曉為
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院昆明植物研究所
• 主分類號: C07D471/04
• 分類號: C07D471/04;A61K31/437;C12P17/10;A61P1/16;A61P3/06;C12R1/465
• 代理公司: 昆明協(xié)立知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 53108
• 代理人: 旃習(xí)涵

本發(fā)明公開了兩種新的異喹啉生物堿類化合物及其制備方法和活性應(yīng)用，所述化合物是由Streptomyces sp.HE?271液體發(fā)酵后所獲得的發(fā)酵液經(jīng)乙酸乙酯萃取和濃縮后，再經(jīng)硅膠柱層析及C?18柱層析所得到的一類化合物。本發(fā)明開發(fā)了新的具有同類母核的先導(dǎo)化合物，具有較好的降脂效果，對我國脂肪肝、肝硬化藥物的開發(fā)研究具有重要意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，具體涉及異喹啉類化合物，以它們?yōu)榛钚砸蜃映煞值乃幬锝M合物，以及它們的制備方法和在制備治療脂肪性肝病等疾病的藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

脂肪性肝病(FLD)是指各種原因引起的肝細胞內(nèi)過多的脂肪堆積，當脂肪含量超過肝重的5％即稱為脂肪肝。FLD是一種遺傳-環(huán)境-代謝應(yīng)激相關(guān)性疾病，大量研究表明，脂肪肝與肝纖維化和肝硬化之間關(guān)系密切。無論是何種原因引起的脂肪肝，部分患者最終可發(fā)展為肝硬化，因此(FLD)為發(fā)達國家和地區(qū)第一大慢性肝病，對人類健康和社會發(fā)展構(gòu)成嚴重威脅。

異喹啉生物堿是生物堿類成分的重要組成部分，該類生物堿在植物和微生物中分布較廣，結(jié)構(gòu)類型復(fù)雜，藥用價值大，具有多方面的生理活性，近年的研究表明這類化合物在抗癌、抗虐、抗炎、降脂和治療心血管疾病等方面有明顯的作用，是新藥開發(fā)的重要資源。

本發(fā)明制備的兩種新的異喹啉類化合物，對肝脂肪變性有較好的抑制作用，可以作為先導(dǎo)化合物用于對脂肪變性性肝病的治療。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供兩種新的異喹啉類化合物，以它們?yōu)榛钚砸蜃映煞值乃幬锝M合物，以及它們的制備方法和在制備治療脂肪性肝病等疾病的藥物中的應(yīng)用。

為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

如下結(jié)構(gòu)式所示的異喹啉類化合物1和2，

本發(fā)明同時還提供了一種藥物組合物，其中含有治療量的異喹啉類化合物1和/或2，和至少一種藥學(xué)上可接受的載體，

本發(fā)明還提供了所述的異喹啉類化合物1和2的制備方法，該方法以Streptomycessp.HE-271為發(fā)酵菌株，經(jīng)發(fā)酵分離純化得到產(chǎn)物，發(fā)酵前對菌株進行斜面培養(yǎng)、種子培養(yǎng)，

根據(jù)所述的異喹啉類化合物1和2的制備方法，所述的發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：棉籽餅粉20g/L，玉米淀粉30g/L，麥芽糊精30g/L，葡萄糖10g/L，硫酸鎂1g/L，酵母提取粉5g/L，CaCO₃2g/L，使用去離子水配制，于121℃下滅菌30min，將種子液以5％V/V的移種量接入發(fā)酵搖瓶中，發(fā)酵搖瓶裝液量為50ml/250ml三角燒瓶，于30℃，200rpm旋轉(zhuǎn)式搖床上培養(yǎng)7d；

所述的斜面培養(yǎng)基組成為：斜面培養(yǎng)：培養(yǎng)基組成：大豆粉20g/L，甘露醇20g/L，瓊脂粉20g/L，pH7.0～7.2，使用去離子水配制和定容，于121℃下滅菌30min，接菌后置于30℃培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)3d；

所述的種子培養(yǎng)基組成為：胰蛋白胨17g/L，植物蛋白胨3g/L,氯化鈉5g/L,磷酸氫二鉀2.5g/L,葡萄糖2.5g/L，pH7.0～7.2，使用去離子水配制，于121℃下滅菌30min，將成熟平板上的孢子，用滅菌后的接種竹簽挖塊接種于種子培養(yǎng)搖瓶中，種子搖瓶裝液量50ml/250ml，于30℃，200rpm旋轉(zhuǎn)式搖床上培養(yǎng)72h。

根據(jù)所述的異喹啉類化合物1和2的制備方法，所述的分離純化的方法為：發(fā)酵液用離心機在4000rpm下離心，上清液用乙酸乙酯進行萃取5-6次，濃縮粗提物后進行硅膠柱層析、C-18柱層析，得化合物。

根據(jù)所述的異喹啉類化合物1和2的制備方法，所述硅膠柱層析用到的填料是200～300目的硅膠，流動相為體積比石油醚:乙酸乙酯＝100:0-0:100進行梯度洗脫，流速為50-100ml/min，收集洗脫液，薄層層析檢測合并相同組分。