[發(fā)明專利]一種從黑金剛馬鈴薯中制備綠原酸單體的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810769553.1
• 申請日: 2018-07-13
• 公開（公告）號: CN108658770B
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 侯建軍;劉細(xì)霞;張雪莉;曾麗君;馬秋平;李雅妮;侯垚瑤;陸琪;陳思銳
• 申請（專利權(quán)）人: 湖北師范大學(xué)
• 主分類號: C07C69/732
• 分類號: C07C69/732;C07C67/48;C07C67/56;C07C67/58
• 代理公司: 武漢智嘉聯(lián)合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 42231
• 代理人: 陳建軍

本發(fā)明公開了一種從黑金剛馬鈴薯中制備綠原酸單體的方法，包括如下步驟：(1)向黑金剛馬鈴薯粉末中加入提取液制備綠原酸提取液；(2)將所述綠原酸提取液以1～3mL/min的流速經(jīng)過大孔樹脂吸附柱，用水洗滌和乙醇洗脫后，得綠原酸粗品；(3)將綠原酸粗品配制成第一綠原酸溶液，并用乙酸乙酯萃取第一綠原酸溶液1～2次，收集乙酸乙酯層，經(jīng)濃縮干燥得綠原酸精品；(4)將綠原酸精品配制成第二綠原酸溶液，用半制備型液相色譜對第二綠原酸溶液進(jìn)行分離，將收集的樣品經(jīng)濃縮和干燥后，得綠原酸單體。本發(fā)明通過溶劑提取法、乙酸乙酯萃取和半制備高效液相色譜從黑金剛馬鈴薯中提取綠原酸，制得的綠原酸單體的純度達(dá)到97～99％。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于綠原酸單體制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從黑金剛馬鈴薯中制備綠原酸單體的方法。

背景技術(shù)

綠原酸是一類含有羥基和鄰二酚羥基的有機酸，化學(xué)名為5-O-咖啡酰基奎尼酸，是植物體在有氧呼吸過程中經(jīng)莽草酸途徑產(chǎn)生的一種苯丙素類化合物。綠原酸是一種重要的生物活性物質(zhì)，具有廣泛的藥理作用和生物活性，不僅是眾多藥材和中成藥抗菌解毒、消炎利膽的主要有效成分，還具有抗病毒、增高白血球、抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基和興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)等作用。綠原酸廣泛存在于植物中，以金銀花、杜仲中的含量較高，目前主要從金銀花和杜仲等植物中提取綠原酸。

黑金剛馬鈴薯的種皮烏黑發(fā)亮且富有光澤，因其富含紫色花青素而呈黑紫色，它是我國引種栽培，集藥食兩用于一身的稀有馬鈴薯品種。目前國內(nèi)外對黑金剛馬鈴薯中的活性成分的研究主要集中于天然色素，但本課題組在研究過程中范縣黑金剛馬鈴薯中含有一種比色素含量更豐富的物質(zhì)，通過對該物質(zhì)進(jìn)行單體分離、純化和結(jié)構(gòu)表征后，證實該物質(zhì)為綠原酸。目前主要從金銀花和杜仲等植物中提取綠原酸，例如：專利申請?zhí)枮?01710075147.0的申請文件公開了一種從綠咖啡豆中提取綠原酸的方法，其主要利用設(shè)備進(jìn)行提取；專利申請?zhí)枮?01711344050.1的申請文件公開了一種從杜仲中提取綠原酸的方法，其主要通過酶解方法提取；專利申請?zhí)枮?01810154455.7的申請文件公開了一種從新鮮的紅薯葉中提取綠原酸的方法，其為了保證提取效率，采用了超聲波提取法、微波輔助乙醇提取法和酶解輔助乙醇提取法。尚未見有從黑金剛馬鈴薯中提取綠原酸的報道，且第一項發(fā)明中需要用到噴霧干燥機組，對設(shè)備的要求高，且提取綠原酸的純度較低，僅為70.3％，不能滿足作為定量標(biāo)準(zhǔn)品和綠原酸的功能研究；后兩項發(fā)明中需要采用酶解的方法，在酶解的過程中引入酶及酶解產(chǎn)物，增加了分離純化的難度，且提取得到的綠原酸的純度仍然不夠高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服上述技術(shù)不足，提出一種綠原酸單體純度高的提取方法，本發(fā)明的另一目的在于提供一種從黑金剛馬鈴薯中提取綠原酸的方法。

為達(dá)到上述技術(shù)目的，本發(fā)明的技術(shù)方案提供一種從黑金剛馬鈴薯中制備綠原酸單體的方法，包括如下步驟：

S1.向黑金剛馬鈴薯粉末中加入提取液制備綠原酸提取液；

S2.將所述綠原酸提取液以1～3mL/min的流速經(jīng)過大孔樹脂吸附柱，吸附飽和后，用水洗滌大孔樹脂吸附柱，再用乙醇溶液洗脫綠原酸，收集洗脫液，經(jīng)濃縮干燥得綠原酸粗品；

S3.將所述綠原酸粗品配制成第一綠原酸溶液，并用乙酸乙酯萃取所述第一綠原酸溶液1～2次，收集乙酸乙酯層，經(jīng)濃縮干燥得綠原酸精品；

S4.將所述綠原酸精品配制成第二綠原酸溶液，用半制備型液相色譜對所述第二綠原酸溶液進(jìn)行分離，用甲酸溶液-乙腈梯度洗脫，收集保留時間13.3～14.3min的樣品，再經(jīng)濃縮和干燥后，得綠原酸單體。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果包括：

1、本發(fā)明通過溶劑提取法、乙酸乙酯一步萃取，萃取液中綠原酸的純度達(dá)到72～75％，再聯(lián)合半制備型液相色譜從黑金剛馬鈴薯中提取綠原酸單體，最終制得的綠原酸單體的純度達(dá)到97～99％，明顯高于現(xiàn)有技術(shù)中提取的綠原酸單體的純度，本發(fā)明制得的綠原酸單體的純度達(dá)到定量標(biāo)準(zhǔn)品和功能研究的要求；