[發明專利]分離紅霉素B的方法以及制備紅霉素B對照品的方法

在審

• 申請號: 201810768777.0
• 申請日: 2018-07-13
• 公開（公告）號: CN108864229A
• 公開（公告）日: 2018-11-23
• 發明（設計）人: 梁桂挺;辛立波;劉國柱
• 申請（專利權）人: 廣東東陽光藥業有限公司
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/06
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 趙天月

1.一種分離紅霉素B的方法，其特征在于，包括：

將紅霉素樣品進行高效液相色譜分離，以便獲得紅霉素B；

其中，所述高效液相色譜分離的條件如下所示：

色譜柱：DAC-HB100，填料ACCHROM C18TDE(100*250mm,10um)；

色譜柱溫度：室溫；

流動相：0.01～0.02mol/L磷酸氫二鉀-乙腈，所述0.01mol/L磷酸氫二鉀和乙腈的體積比為50:50～50：55，所述磷酸氫二鉀預先溶于水中；

流速：450～470mL/min；

等度洗脫；

檢測波長215nm。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述紅霉素樣品中紅霉素B的含量為不小于5％。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述紅霉素樣品預先進行溶解和過濾處理；

任選地，所述紅霉素樣品預先溶于甲醇中，濃度為1g/mL；

任選地，所述過濾處理是將溶解后的紅霉素樣品經過0.45μm的有機濾膜進行的。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述紅霉素樣品的上樣量為20mL。

5.一種制備紅霉素B對照品的方法，其特征在于，

1)利用權利要求1～4任一項所述的方法從紅霉素樣品中分離紅霉素B；

2)將步驟1)獲得的紅霉素B進行一次萃取處理；

3)將萃取產物進行重結晶處理，以便獲得所述紅霉素B對照品。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述萃取處理是通過將所述步驟1)獲得的紅霉素B與二氯甲烷進行接觸進行的；

任選地，所述步驟1)獲得的紅霉素B是以含有紅霉素B的流分的形式存在的，所述紅霉素B的流分與所述二氯甲烷的體積比為1L:(90～100)mL；

任選地，萃取處理后進一步包括將萃取處理產物的有機層進行旋轉蒸干處理，以便獲得紅霉素B粗品；

任選地，所述旋轉蒸干處理是在40℃～45℃的條件下進行的。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述重結晶處理是通過如下方式進行的：

將所述萃取產物溶解在乙醇溶液中；以及

將溶解在乙醇溶液中的萃取產物進行析出處理，析出產物構成所述紅霉素B對照品；

任選地，所述乙醇溶液的濃度為70％～80％；

優選地，將所述萃取產物溶解在70℃～80℃的所述乙醇溶液中；以及

將溶解在乙醇溶液中的萃取產物在0℃～5℃的條件下進行析出處理。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，進一步包括將析出產物在60～65℃的烘箱中進行烘干處理；

任選地，析出處理之后，烘干處理之前，進一步包括將析出處理產物進行過濾處理。

9.一種制備紅霉素B對照品的方法，其特征在于，

1)將紅霉素樣品進行甲醇溶解和0.45μm的有機濾膜過濾處理，所述紅霉素樣品中紅霉素B的含量為不小于5％，所述紅霉素樣品在甲醇中的濃度為1g/mL；

2)將步驟1)獲得濾液進行高效液相色譜分離，以便獲得含有紅霉素B的流分，

其中，上樣量為20mL，所述高效液相色譜分離的條件如下所示：

色譜柱：DAC-HB100，填料ACCHROM C18TDE(100*250mm,10um)；

色譜柱溫度：室溫；

流動相：0.01～0.02mol/L磷酸氫二鉀-乙腈，所述0.01mol/L磷酸氫二鉀和乙腈的體積比為50:50～50：55，所述磷酸氫二鉀預先溶于水中；

流速：450～470mL/min；

等度洗脫；

檢測波長215nm；

高效液相色譜分離系統在上述條件下平衡5～6min；

3)將含有紅霉素B的流分進行二氯甲烷萃取處理，所述含有紅霉素B的流分與所述二氯甲烷的體積比為1L:(90～100)mL，取萃取處理后的有機層在40℃～45℃的條件下進行旋轉蒸干處理，以便獲得紅霉素B粗品；

4)將所述紅霉素B粗品溶解在70℃～80℃的濃度為70％～80％的乙醇溶液中，并將溶解有紅霉素B粗品乙醇溶液在0℃～5℃的條件下進行析出處理，并將析出產物進行過濾以及在60～65℃的烘箱中進行烘干處理，以便獲得紅霉素B對照品。