[發明專利]一種pnCasPA-BEC質粒及其應用在審
| 申請號： | 201810767194.6 | 申請日： | 2018-07-12 |
| 公開（公告）號： | CN109022477A | 公開（公告）日： | 2018-12-18 |
| 發明（設計）人： | 季泉江;陳未中 | 申請（專利權）人： | 上海科技大學 |
| 主分類號： | C12N15/78 | 分類號： | C12N15/78;C12N1/21;C12N15/10;C12R1/19;C12R1/385;C12R1/40;C12R1/38 |
| 代理公司： | 上海申匯專利代理有限公司 31001 | 代理人： | 翁若瑩;王婧 |
| 地址： | 200120 上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 質粒 質粒復制子 假單胞菌 應用 大腸桿菌 氨基酸突變 假單胞菌株 代謝產物 基因片段 基因失活 生理特性 胸腺嘧啶 胞嘧啶 基因組 位點 研究 | ||
1.一種pnCasPA-BEC質粒，其特征在于，含有能夠表達APOBEC1-nCas9的基因片段以及假單胞菌中的質粒復制子。
2.如權利要求1所述的pnCasPA-BEC質粒，其特征在于，所述的pnCasPA-BEC質粒還含有大腸桿菌中的質粒復制子。
3.如權利要求1所述的pnCasPA-BEC質粒，其特征在于，所述的pnCasPA-BEC質粒含有兩個BsaI位點，能夠用來插入spacer片段。
4.如權利要求1所述的pnCasPA-BEC質粒，其特征在于，所述的pnCasPA-BEC質粒含有sacB反向篩選基因。
5.如權利要求1所述的pnCasPA-BEC質粒，其特征在于，所述的pnCasPA-BEC質粒還含有慶大霉素抗性基因片段Gm、sgRNA表達的啟動子trc promoter和APOBEC1-nCas9融合蛋白表達的啟動子rpsL promoter中的至少一種。
6.一種pnCasPA-BEC質粒，其特征在于，所述的pnCasPA-BEC質粒的序列為SEQ ID NO：1。
7.權利要求1-6中任一項所述的pnCasPA-BEC質粒在假單胞菌中進行基因組堿基編輯中的應用。
8.如權利要求7中的應用，其特征在于，所述的基因組堿基編輯是堿基從胞嘧啶到胸腺嘧啶的突變。
9.含有權利要求1-6中任一項所述的pnCasPA-BEC質粒的菌株。
10.含有權利要求1-6中任一項所述的pnCasPA-BEC質粒的細胞。
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