[發(fā)明專利]一種茶樹鮮葉茸毛的提取方法及其應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810765261.0 | 申請日： | 2018-07-12 |
| 公開（公告）號： | CN108913648A | 公開（公告）日： | 2018-11-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 岳川;曹紅利;孫云;林宏政;葉乃興 | 申請（專利權(quán)）人： | 福建農(nóng)林大學(xué) |
| 主分類號： | C12N5/04 | 分類號： | C12N5/04;C12N15/10 |
| 代理公司： | 福州元創(chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡學(xué)俊;林文弘 |
| 地址： | 350002 福*** | 國省代碼： | 福建;35 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 茸毛 離心管 茶樹鮮葉 液氮冷凍 放入 附著 管壁 分子生物學(xué)研究 代謝物分析 旋渦混合器 方法提取 快速冷凍 快速提取 連續(xù)振動 樣品表面 茶樹芽 茶樹 手握 藥匙 液氮 葉片 冷凍 應(yīng)用 摩擦 保存 新鮮 重復(fù) 研究 | ||
1.一種茶樹鮮葉茸毛的提取方法，其特征在于，具體包括如下步驟：
（1）取單芽、一芽一葉、一芽二葉和一芽三葉的茶樹鮮葉，取下含茸毛的葉片和芽組織，自然舒展裝入50ml離心管中，樣品體積不超過離心管體積的2/3，擰緊離心管蓋子，放入液氮中快速冷凍50s~150s；
（2）迅速從液氮中取出步驟（1）的裝樣品的離心管，用手握住置于旋渦混合器上連續(xù)振動20s~30s，通過振動作用將茸毛抖動脫落，脫落后的茸毛將黏于管壁和管底上；
（3）另取一個離心管放入液氮中冷凍，快速擰開步驟（2）的離心管蓋子，用液氮冷凍過的藥匙迅速刮下黏在管壁上的茸毛，將茸毛轉(zhuǎn)入液氮冷凍著的離心管中，倒掉提取過的樣品，再用藥匙將管底的茸毛取出，迅速放入裝茸毛的冷凍離心管中；
（4）將提取到的茸毛樣品放入-80℃超低溫冰箱保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種茶樹鮮葉茸毛的提取方法，其特征在于，步驟（2）中旋渦混合器的振動頻率在1200~2800 r/min。
3.如權(quán)利要求1所述的提取方法提取到的茶樹茸毛的應(yīng)用，其特征在于，所述茶樹茸毛在提取茶樹茸毛總RNA中的應(yīng)用。
4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，具體操作如下：將提取的茸毛樣品置于液氮中研磨成粉末，取出100mg粉末，用離心柱型植物總RNA提取試劑盒提取茸毛中的總RNA。
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