[發明專利]玻璃體內注射的對抗體藥物雙重保護的微球及其制備方法

有效

• 申請號: 201810757645.8
• 申請日: 2018-07-11
• 公開（公告）號: CN108938600B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發明（設計）人: 李又欣;劉佳欣;孫鳳英;李爽;滕樂生
• 申請（專利權）人: 南京銳利施生物技術有限公司
• 主分類號: A61K9/52
• 分類號: A61K9/52;A61K47/34;A61K39/395;A61P27/02
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100
• 代理人: 陳宏偉

本發明提供玻璃體內注射的對抗體藥物雙重保護的微球及其制備方法，采用水相?水相乳化制備單克隆抗體藥物的微粒，聚乳酸?羥基乙酸共聚物和聚縮酮為載體材料，采用水相包油相包固相的乳化溶劑揮發法制備包裹并運載右旋糖酐?單克隆抗體藥物微粒的緩釋微球。有機相/水相界面和降解過程中聚乳酸?羥基乙酸的酸性微環境引起的抗體的變性和聚集，提高微球載藥量以及降低微球釋放過程中的突釋現象，實現了對微球中單克隆抗體藥物的雙重保護；聚縮酮提高微球載藥量，降低聚乳酸?羥基乙酸的酸性降解產物對眼部環境的刺激，降低了眼內炎等副作用，微球在體外環境下可以緩釋單克隆抗體不少于28天，在眼內則不少于2個月，可以減少給藥頻次，從而減輕患者痛苦和經濟負擔，提高患者依從性。

技術領域

本發明涉及一種玻璃體內注射的對抗體藥物雙重保護的微球，本發明進一步提供了其制備方法，屬于醫藥技術領域。

背景技術

視網膜疾病已成為我國繼白內障之后的第二大致盲原因，其中年齡相關性黃斑變性(AMD)是公認的最難治療的眼病之一，脈絡膜新生血管化(CNV)是其導致視力減退的最重要原因。其中血管內皮生長因子(VEGF)及其受體在病理性新生血管的增殖和修復中起著重要作用。異常的血管生成會引起眼部血管性疾病的血管滲漏。因此抗VEGF藥物成為治療濕性老年性黃斑變性的關鍵。

阿柏西普（Eylea?）是全球首個完全人源化的融合蛋白，一種可與VEGF-A、PIGF結合的可溶性誘餌受體，可抑制內源性VEGF受體與VEGF-A和PIGF的結合和激活，從而抑制新生血管的形成以及減少血管的通透性。未結合VEGF的阿柏西普半衰期為1~3d，而已結合VECF者半衰期為18d，這使得需要頻繁玻璃體注射給藥，這不僅增加了患者的痛苦及經濟負擔，最重要的是在重復注射的過程中發生并發癥的概率也大幅度增加了，如玻璃體出血，視網膜脫離，眼內炎，白內障等。類似的治療視網膜后部疾病的抗體藥物還包括雷珠單抗（Lucentis?），貝伐單抗（Avastin?）和康柏西普等。

注射用緩釋微球制劑已經被廣泛用于蛋白和抗體藥物的緩控釋給藥系統，可有效拓寬給藥途徑，減少給藥次數和藥量，因此得到越來越廣泛的應用。微球制劑中目前應用最多的是基于生物可降解材料PLGA的微球制劑。該材料已被美國FDA批準用于緩釋藥物載體和其他人體植入的裝置。但是PLGA系統主要缺點是降解材料內部酸性降解產物的累積，這會致使抗體藥物吸附或聚合，導致活性喪失或產生免疫原性，并且使蛋白質釋放不完全。而且在眼內給藥方面，由于眼部特殊的生理結構特點，酸性物質的產生會對眼睛造成刺激，易引起眼內炎等副作用，對眼睛造成不可逆的傷害。微球有著多種制備方法，如溶劑揮發法、共乳化法、噴霧干燥法、超聲波輔助霧化法、以及微流控法。對于水溶性強的抗體藥物而言，將抗體藥物包載于微球制劑中最常用的方法是水包油包水乳化溶劑揮發法。但是由藥物分子量大，結構比較脆弱，制備過程中產生的有機相/水相界面易引起抗體的變性和聚集，致使藥物活性降低。且內水相中的藥物由于親水性易擴散到外水相中，致使載藥量和包封率降低。

發明內容

本發明的目的是提供一種玻璃體內注射的對抗體藥物雙重保護的微球及其制備方法，為治療年齡相關性黃斑變性的載有單克隆抗體的雙重保護的緩釋微球的制備方法。該方法首先采用水相-水相乳化的方法制備右旋糖酐保護的單克隆抗體藥物的微粒，然后以生物可降解材料聚乳酸-羥基乙酸共聚物和降解產物為中性的聚縮酮為載體材料，采用水相包油相包固相（S/O/W）的乳化溶劑揮發法制備包裹并運載右旋糖酐-單克隆抗體藥物微粒的緩釋微球。

本發明所述的一種玻璃體內注射的對抗體藥物雙重保護的緩釋微球的制備方法，包括以下步驟：

1）稱取450-1500mg右旋糖酐和6000mg PEG溶解于60mL去離子水中，加入單克隆抗體藥物150mg，渦旋處理5min，冷凍干燥。凍干后得到的粉末用二氯甲烷離心洗滌洗3次以除去PEG分散相，真空干燥即得單克隆抗體-右旋糖酐微粒；