[發(fā)明專利]大豆蛋白的應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810749922.0 | 申請日： | 2018-07-10 |
| 公開（公告）號： | CN108866031B | 公開（公告）日： | 2020-06-30 |
| 發(fā)明（設計）人： | 劉昀;張凜松;鄭易之;孫楠;譚芳美;吳佳輝;程華 | 申請（專利權）人： | 深圳大學 |
| 主分類號： | C12N9/96 | 分類號： | C12N9/96;C12N15/29;C12N15/70;C07K14/415 |
| 代理公司： | 深圳市恒申知識產權事務所(普通合伙) 44312 | 代理人： | 袁文英 |
| 地址： | 518060 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 大豆蛋白 應用 | ||
1.一種大豆蛋白的應用，其特征在于，所述大豆蛋白用于制備凍存LDH酶的保護劑；其中，所述大豆蛋白的編碼序列如SEQ ID NO:1所示。
2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述大豆蛋白的制備方法包括如下步驟：
擴增所述大豆蛋白的編碼序列；
構建包含所述編碼序列的重組質粒；
將所述重組質粒轉化至感受態(tài)細胞，進行誘導表達；
將誘導表達后的菌液進行蛋白分離純化，得到所述大豆蛋白。
3.如權利要求2所述的應用，其特征在于，擴增所述大豆蛋白的編碼序列的引物對如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示；和/或
擴增所述大豆蛋白的編碼序列的模板為大豆胚根cDNA。
4.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述重組質粒由蛋白表達載體PET-28a與所述大豆蛋白的編碼序列重組得到。
5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述重組質粒的制備步驟包括：將所述蛋白表達載體PET-28a經Nde I和Xho I雙酶切處理，然后利用T4連接酶將酶切產物與所述大豆蛋白的編碼序列連接。
6.如權利要求5所述的應用，其特征在于，將所述大豆蛋白的編碼序列與雙酶切處理的所述蛋白表達載體PET-28a按照摩爾比10:1混合進行連接。
7.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述感受態(tài)細胞為大腸桿菌BL21 Star感受態(tài)細胞。
8.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述誘導表達的步驟包括：將含有所述重組質粒的感受態(tài)細胞擴大培養(yǎng)，然后加入1‰IPTG的貯存液，在16℃下150rmp誘導。
9.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述蛋白分離純化的步驟包括鎳離子親和層析。
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