[發明專利]一種重組絨促性素(rhCG)的純化方法在審
| 申請號: | 201810748891.7 | 申請日: | 2018-07-10 |
| 公開(公告)號: | CN108503705A | 公開(公告)日: | 2018-09-07 |
| 發明(設計)人: | 羅昊澍;張志學;韓國;師磊 | 申請(專利權)人: | 北京偉杰信生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C07K14/59 | 分類號: | C07K14/59;C07K1/18;C07K1/22;C07K1/20 |
| 代理公司: | 北京旭路知識產權代理有限公司 11567 | 代理人: | 董媛;王瑩 |
| 地址: | 100085 北京*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 重組人絨毛膜促性腺激素 陰離子交換層析 大規模純化 親和層析 絨促性素 疏水層析 | ||
1.一種重組hCG的純化方法,其特征在于,所述的純化工藝使rhCG經受以下步驟:(1)親和層析;(2)疏水層析;(3)陰離子交換層析。
2.根據權利要求1所述的重組hCG純化方法,其特征在于,步驟(1)所述的親和層析采用一種帶有多芳香環的磺化物配基的染料親和介質(簡稱藍膠)。
3.根據權利要求1至2中任一權利要求所述重組hCG純化的方法,其特征在于,步驟(1)所述的親和層析用瓊脂糖親和介質。
4.根據權利要求1至3中的任一權利要求所述的重組hCG純化方法,其特征在于,步驟(1)所述的親和層析用Tris-HCl緩沖液作為洗脫液,其pH值為8.5或大約為8.5。
5.根據權利要求1所述的重組hCG純化方法,其特征在于,步驟(2)所述的疏水作用層析用苯基瓊脂糖凝膠FF。
6.根據權利要求1和5所述的重組hCG純化方法,其特征在于,步驟(2)所述的疏水層析用濃度為10mM磷酸鹽緩沖液作為洗脫液。
7.根據權利要求1所述的重組hCG純化方法,其特征在于,步驟(3)所述的陰離子交換層析用一種有弱堿型的二乙基氨基乙基的螯合集團的樹脂。
8.根據權利要求1所述的重組hCG純化方法,其特征在于,步驟(3)所述的陰離子交換層析用瓊脂糖凝膠FF;用醋酸銨作為洗脫液,其pH值為8.5或大約為8.5。
9.一種重組hCG的純化方法,其特征在于,所述的方法包括使rhCG經受以下步驟:
(0)深層過濾;
(1)在瓊脂糖親和介質上用20mM或大約20mM的Tris-HCl,1M或大約1M的NaCl,pH值8.5或大約為8.5作為洗脫液進行親和層析。
(2)將步驟(1)的洗出液在苯基瓊脂糖凝膠FF上進行疏水租用層析步驟,以10mM或大約10mM磷酸鹽緩沖液,pH值為7.2或大約7.2作為洗脫液。
(3)將步驟(2)的洗出液在DEAE瓊脂糖凝膠FF上進行陰離子交換層析步驟,以0.11M或大約0.11M醋酸銨,pH值為8.5或大約為8.5作為洗脫液。
10.一種純化的rhCG,其特征在于,所述的純化的rhCG通過權利要求書1至9中的任一權利要求所述的方法得到。
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