[發明專利]一種獼猴桃組培快速繁殖培養基及方法

有效

• 申請號: 201810748851.2
• 申請日: 2018-07-10
• 公開（公告）號: CN109006473B
• 公開（公告）日: 2021-10-01
• 發明（設計）人: 段珍珍
• 申請（專利權）人: 陜西青美生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京紐樂康知識產權代理事務所(普通合伙) 11210
• 代理人: 羅莎

本發明公開了一種獼猴桃組培快速繁殖培養基及方法，包括誘導葉片分化愈傷組織培養基、誘導莖尖或腋芽萌發生長培養基、誘導愈傷組織分化叢生芽培養基、叢生芽增殖培養基、無糖組培誘導不定根培養基,通過采用內源激素生根法，將無糖營養液置于特定培養容器中，人工控制微環境，既可縮短生根練苗周期，還可以提高移栽成活率。生長旺盛，根系龐大，無需練苗，直接移栽至營養缽或大田中。本發明的無糖生根方法的生產效率是傳統有糖生根方法的18倍以上，大大提高了獼猴桃脫毒苗規模化生產的生產效率。

技術領域

本發明涉及植物組織培養技術領域，具體來說，涉及一種獼猴桃組培快速繁殖培養基及方法。

背景技術

獼猴桃屬獼猴桃科，獼猴桃屬落葉藤本植物，是一種重要的經濟林木和果樹。獼猴桃富含Vc、礦物質和花青苷等營養物質，營養價值和藥用價值高。近年來，被廣泛用于鮮果、飲料、保健用品等食用形式，市場需求量較大。推廣種植可滿足更多消費者的需求，增加果農的經濟收益。然而，其播種繁殖生長周期長、始花年齡長，不利于快速形成獼猴桃的市場價值。

組織培養是一種無性系快速繁殖方法，具有繁殖周期短、遺傳穩定性好、繁殖系數大等特點。但是獼猴桃傳統組培生根困難，易產生變態根、氣生根，根部易長愈傷組織，導致練苗成活率極低。

針對相關技術中的問題，目前尚未提出有效的解決方案。

發明內容

針對相關技術中的上述技術問題，本發明提出一種獼猴桃組培快速繁殖培養基及方法，能夠解決上述技術問題。為實現上述技術目的，本發明的技術方案是這樣實現的：

一種獼猴桃組培快速繁殖方法,包括以下步驟:

S1.選擇獼猴桃當年生的枝條和/或幼嫩葉片作為外植體；

S2.外植體處理,具體包括以下步驟:

當選擇枝條作為外植體時，除去枝條莖段上的葉片保留腋芽或剝取莖尖經過消毒處理后，接入誘導莖尖或腋芽萌發生長培養基中，放置在培養室培養；當選擇幼嫩葉片作為外植體時，將幼嫩葉片消毒處理后，接入誘導葉片分化愈傷組織培養基中，放置在培養室培養；接種后分化出的愈傷組織大小為0.8cm2-2.5cm2時,轉接至誘導愈傷組織分化叢生芽培養基中；

S3.繼代增殖培養，具體包括以下步驟：

當選擇枝條作為外植體時，外植體腋芽、莖尖生長至1.0cm2.5cm，并伴有2-5片新葉產生時，剪下新芽轉接至叢生芽增殖培養基進行擴繁，得到繼代叢生芽；當選擇幼嫩葉片作為外植體時，幼嫩葉片的愈傷組織先分化出不定芽，不定芽長成成高2-4cm的試管苗，將試管苗轉接至叢生芽增殖培養基進行擴繁，得到繼代叢生芽；

S4.生根，具體包括以下步驟：

將繼代叢生芽生長成的幼苗轉接至無糖組培誘導不定根培養基中，培養室CO2濃度為1000ppm-1500ppm，無糖組培誘導不定根培養基配方：NH4NO316.5mg/L,KNO319mg/L,MgSO4·7H2O3.7mg/L,KH2PO41.7mg/L,CaCl 2·2H2O4.4mg/L,KI0.083mg/L,H3BO30.62mg/L,MnSO4·4H2O2.23mg/L,ZnSO4·7H2O0.86mg/L,Na2MnO4·2H2O0.025mg/L,CuSO4·5H2O0.0025mg/L,CoCl2·6H2O0.0025mg/L,FeSO4·7H2O2.78mg/L,Na2-EDTA·2H2O3.73mg/L；

S5.生根后的幼苗直接移栽至營養缽或大田中。

進一步地，誘導葉片分化愈傷組織培養基的配方為：MS培養基1升，6-芐氨基腺嘌呤0.8-1.2mg/L，2,4-二氯苯氧乙酸0.3-0.6mg/L，蔗糖25-30g/L，瓊脂5.8-6g/L。