[發明專利]一種獼猴桃組培快速繁殖培養基及方法

有效

• 申請號: 201810748851.2
• 申請日: 2018-07-10
• 公開（公告）號: CN109006473B
• 公開（公告）日: 2021-10-01
• 發明（設計）人: 段珍珍
• 申請（專利權）人: 陜西青美生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京紐樂康知識產權代理事務所(普通合伙) 11210
• 代理人: 羅莎

1.一種獼猴桃組培快速繁殖方法,其特征在于，包括以下步驟:

S1.選擇獼猴桃當年生的枝條和/或幼嫩葉片作為外植體；

S2.外植體處理,具體包括以下步驟:

當選擇枝條作為外植體時，除去枝條莖段上的葉片保留腋芽或剝取莖尖經過消毒處理后，接入誘導莖尖或腋芽萌發生長培養基中，所述誘導莖尖或腋芽萌發生長培養基配方為：MS培養基1升，6-芐氨基腺嘌呤0.4mg/L，萘乙酸0.1mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂5.8g/L，然后放置在培養室培養；

當選擇幼嫩葉片作為外植體時，將幼嫩葉片消毒處理后，接入誘導葉片分化愈傷組織培養基中，放置在培養室培養，誘導葉片分化愈傷組織培養基的配方為：MS培養基1升，6-芐氨基腺嘌呤1.0mg/L，2,4-二氯苯氧乙酸0.4mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂5.8g/L；接種后分化出的愈傷組織大小為0.8cm²-2.5cm²時,轉接至誘導愈傷組織分化叢生芽培養基中，所述誘導愈傷組織分化叢生芽培養基的配方為：MS培養基1升，玉米素2.0mg/L，萘乙酸0.1mg/L，蔗糖25-30g/L，瓊脂5.8-6g/L；

S3.繼代增殖培養，具體包括以下步驟：

當選擇枝條作為外植體時，外植體腋芽、莖尖生長至1.0cm-2.5cm，并伴有2-5片新葉產生時，剪下新芽轉接至叢生芽增殖培養基進行擴繁，得到繼代叢生芽，所述叢生芽增殖培養基的配方為：MS培養基1升，萘乙酸0.2mg/L，6-芐氨基腺嘌呤0.8mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂5.8g/L；

當選擇幼嫩葉片作為外植體時，幼嫩葉片的愈傷組織先分化出不定芽，不定芽長成高2-4cm的試管苗，將試管苗轉接至叢生芽增殖培養基進行擴繁，得到繼代叢生芽；

S4.生根，具體包括以下步驟：

將繼代叢生芽生長成的幼苗轉接至無糖組培誘導不定根培養基中，培養室CO₂濃度為1000ppm-1500ppm，所述培養室的室內光照20000Lx，濕度50％-90％，溫度25℃-28℃，培養室內換氣15min/h，氣流量90mL/min-180mL/min，無糖組培誘導不定根培養基配方：NH₄NO₃16.5 mg/L,KNO₃19 mg/L,MgSO₄·7H₂O3.7mg/L,KH₂PO₄1.7mg/L,CaCl ₂·2H₂O4.4mg/L,KI0.083mg/L,H₃BO₃0.62mg/L,MnSO₄·4H₂O2.23mg/L,ZnSO₄·7H₂O0.86mg/L,Na₂MnO₄·2H₂O0.025mg/L,CuSO₄·5H₂O0.0025 mg/L,CoCl₂·6H₂O0.0025 mg/L,FeSO₄·7H₂O2.78 mg/L,Na₂-EDTA·2H₂O3.73 mg/L；

S5.生根后的幼苗直接移栽至營養缽或大田中。

2.一種獼猴桃組培快速繁殖培養基，其特征在于，包括誘導葉片分化愈傷組織培養基、誘導莖尖或腋芽萌發生長培養基、誘導愈傷組織分化叢生芽培養基、叢生芽增殖培養基、無糖組培誘導不定根培養基，其中，

誘導葉片分化愈傷組織培養基的配方：MS培養基1升，6-芐氨基腺嘌呤1.0mg/L，2,4-二氯苯氧乙酸0.4mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂5.8g/L；

誘導莖尖或腋芽萌發生長培養基配方：MS培養基1升，6-芐氨基腺嘌呤0.4mg/L，萘乙酸0.1mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂5.8g/L；

誘導愈傷組織分化叢生芽培養基配方：MS培養基1升，玉米素2.0mg/L，萘乙酸0.1mg/L，蔗糖25-30g/L，瓊脂5.8-6g/L；

叢生芽增殖培養基配方：MS培養基1升，萘乙酸0.2mg/L，6-芐氨基腺嘌呤0.8-1.0mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂5.8g/L；

無糖組培誘導不定根培養基配方：NH₄NO₃16.5mg/L,KNO₃19mg/L,MgSO₄·7H₂O3.7mg/L,KH₂PO₄1.7mg/L,CaCl₂·2H₂O4.4mg/L,KI0.083mg/L,H₃BO₃0.62mg/L,MnSO₄·4H₂O2.23mg/L,ZnSO₄·7H₂O0.86mg/L,Na₂MnO₄·2H₂O0.025 mg/L,CuSO₄·5H₂O0.0025 mg/L,CoCl₂·6H₂O0.0025 mg/L,FeSO₄·7H₂O2.78 mg/L,Na₂-EDTA·2H₂O3.73 mg/L。